水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2008年
1期
74-78
,共5页
王锋%周明%赵金梅%赵开弘
王鋒%週明%趙金梅%趙開弘
왕봉%주명%조금매%조개홍
藻红蓝蛋白β亚基%体内重组%水解%色谱分析
藻紅藍蛋白β亞基%體內重組%水解%色譜分析
조홍람단백β아기%체내중조%수해%색보분석
藻胆蛋白是蓝藻中的捕光蛋白,其生物合成的重要一步是藻胆色素与脱辅基蛋白的连接.大多数藻胆色素的正确连接都需要结合位点专一和对色素的构象有选择性的裂合酶来催化完成,但是这方面的报道不是很多.藻红蓝蛋白由两个亚基组成,β亚基(简称β-PEC)含171个氨基酸残基及两个辅基色素藻蓝胆素(简称PCB),分别在Cys-84和Cys-155位以硫醚键共价相连.通过同源性分析获得的由编号为alr0617基因编码的蛋白为藻红蓝蛋白β亚基(β-PEC)中的Cys-84与PCB的连接的催化酶.为了研究层理鞭枝藻藻红蓝蛋白(PEC)β亚基(β-PEC)中藻蓝胆素(PCB)与脱辅基蛋白的连接机制,通过体内重组方式得到色素蛋白PCB-PecB(C155I),分析表明该色素蛋白与β-PEC的吸收光谱和荧光光谱一致.酸性尿素变性实验证明得到的色素蛋白中的藻蓝胆素PCB没有被破坏.使用胃蛋白酶对天然藻红蓝色素蛋白和重组藻红蓝色素蛋白进行相同条件的水解并得到各自的色素肽,高效液相色谱分析表明这两种色素肽相同,由此证明了编号为alr0617基因编码的蛋白质能催化PCB与PecB(C155I)正确共价偶联.
藻膽蛋白是藍藻中的捕光蛋白,其生物閤成的重要一步是藻膽色素與脫輔基蛋白的連接.大多數藻膽色素的正確連接都需要結閤位點專一和對色素的構象有選擇性的裂閤酶來催化完成,但是這方麵的報道不是很多.藻紅藍蛋白由兩箇亞基組成,β亞基(簡稱β-PEC)含171箇氨基痠殘基及兩箇輔基色素藻藍膽素(簡稱PCB),分彆在Cys-84和Cys-155位以硫醚鍵共價相連.通過同源性分析穫得的由編號為alr0617基因編碼的蛋白為藻紅藍蛋白β亞基(β-PEC)中的Cys-84與PCB的連接的催化酶.為瞭研究層理鞭枝藻藻紅藍蛋白(PEC)β亞基(β-PEC)中藻藍膽素(PCB)與脫輔基蛋白的連接機製,通過體內重組方式得到色素蛋白PCB-PecB(C155I),分析錶明該色素蛋白與β-PEC的吸收光譜和熒光光譜一緻.痠性尿素變性實驗證明得到的色素蛋白中的藻藍膽素PCB沒有被破壞.使用胃蛋白酶對天然藻紅藍色素蛋白和重組藻紅藍色素蛋白進行相同條件的水解併得到各自的色素肽,高效液相色譜分析錶明這兩種色素肽相同,由此證明瞭編號為alr0617基因編碼的蛋白質能催化PCB與PecB(C155I)正確共價偶聯.
조담단백시람조중적포광단백,기생물합성적중요일보시조담색소여탈보기단백적련접.대다수조담색소적정학련접도수요결합위점전일화대색소적구상유선택성적렬합매래최화완성,단시저방면적보도불시흔다.조홍람단백유량개아기조성,β아기(간칭β-PEC)함171개안기산잔기급량개보기색소조람담소(간칭PCB),분별재Cys-84화Cys-155위이류미건공개상련.통과동원성분석획득적유편호위alr0617기인편마적단백위조홍람단백β아기(β-PEC)중적Cys-84여PCB적련접적최화매.위료연구층리편지조조홍람단백(PEC)β아기(β-PEC)중조람담소(PCB)여탈보기단백적련접궤제,통과체내중조방식득도색소단백PCB-PecB(C155I),분석표명해색소단백여β-PEC적흡수광보화형광광보일치.산성뇨소변성실험증명득도적색소단백중적조람담소PCB몰유피파배.사용위단백매대천연조홍람색소단백화중조조홍람색소단백진행상동조건적수해병득도각자적색소태,고효액상색보분석표명저량충색소태상동,유차증명료편호위alr0617기인편마적단백질능최화PCB여PecB(C155I)정학공개우련.
