细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
4期
328-331
,共4页
孙岩%张娟娟%韩婷婷%李东亮%曹雪梅%李武修%高玉光
孫巖%張娟娟%韓婷婷%李東亮%曹雪梅%李武脩%高玉光
손암%장연연%한정정%리동량%조설매%리무수%고옥광
釉成熟蛋白%原核表达%多克隆抗体
釉成熟蛋白%原覈錶達%多剋隆抗體
유성숙단백%원핵표체%다극륭항체
目的:表达并纯化小鼠釉成熟蛋白(Amelotin), 制备多克隆抗体, 并进行初步鉴定.方法:RT-PCR获得Amelotin成熟肽片段, 构建pET32a-Amelotin, IPTG诱导表达Amelotin, 纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体, ELISA检测抗体滴度.Western blot和免疫组织化学鉴定抗体特异性.结果:成功构建了Amelotin重组表达载体pET32a-Amelotin,表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔, 得到的多克隆抗体ELISA显示抗体效价可以达到1:12 800.Western blot分析表明该抗体能特异结合Amelotin, 免疫组化分析表明自制的抗体能特异的与Amelotin相互作用.结论:以纯化的Amelotin为免疫原, 成功地制备了效价及特异性较高的兔抗Amelotin抗体,为进一步建立简便的Amelotin检测方法及研究Amelotin生物学功能奠定了良好的基础.
目的:錶達併純化小鼠釉成熟蛋白(Amelotin), 製備多剋隆抗體, 併進行初步鑒定.方法:RT-PCR穫得Amelotin成熟肽片段, 構建pET32a-Amelotin, IPTG誘導錶達Amelotin, 純化後免疫新西蘭大白兔製備多剋隆抗體, ELISA檢測抗體滴度.Western blot和免疫組織化學鑒定抗體特異性.結果:成功構建瞭Amelotin重組錶達載體pET32a-Amelotin,錶達的重組蛋白純化後免疫新西蘭大白兔, 得到的多剋隆抗體ELISA顯示抗體效價可以達到1:12 800.Western blot分析錶明該抗體能特異結閤Amelotin, 免疫組化分析錶明自製的抗體能特異的與Amelotin相互作用.結論:以純化的Amelotin為免疫原, 成功地製備瞭效價及特異性較高的兔抗Amelotin抗體,為進一步建立簡便的Amelotin檢測方法及研究Amelotin生物學功能奠定瞭良好的基礎.
목적:표체병순화소서유성숙단백(Amelotin), 제비다극륭항체, 병진행초보감정.방법:RT-PCR획득Amelotin성숙태편단, 구건pET32a-Amelotin, IPTG유도표체Amelotin, 순화후면역신서란대백토제비다극륭항체, ELISA검측항체적도.Western blot화면역조직화학감정항체특이성.결과:성공구건료Amelotin중조표체재체pET32a-Amelotin,표체적중조단백순화후면역신서란대백토, 득도적다극륭항체ELISA현시항체효개가이체도1:12 800.Western blot분석표명해항체능특이결합Amelotin, 면역조화분석표명자제적항체능특이적여Amelotin상호작용.결론:이순화적Amelotin위면역원, 성공지제비료효개급특이성교고적토항Amelotin항체,위진일보건립간편적Amelotin검측방법급연구Amelotin생물학공능전정료량호적기출.
