CAJ | 학술논문

嗜热子囊菌是一种嗜热真菌,可以产生具有很高工业价值的内切葡聚糖酶.本研究成功表达了嗜热子囊菌内切葡聚糖酶Ⅰ基凶,并获得热稳定的重组内切葡聚糖酶.提取嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)总RNA,通过RT-PCR方法克隆出内切-β-葡聚糖酶eg1基因的成熟肽编码序列.采用基因重组的方法构建该基因的巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris分泌型表达载体pPIC9K-eg1,经线性化后采用电穿孔法将其导入毕赤酵母GS115中,大量筛选后获得高效表达内切葡聚糖酶Ⅰ的毕赤酵母工程菌株GpN24.该菌株采用甲醇诱导120 h后,内切葡聚糖酶Ⅰ的活力可达570.7 U/mL,最适温度为55℃,在90℃的条件下保温30 min后仍具有60%的酶活力;最适pH为5.0,在pH 3.0～5.0的条件下酶活力保持稳定.图6表2参16
기열자낭균시일충기열진균,가이산생구유흔고공업개치적내절포취당매.본연구성공표체료기열자낭균내절포취당매Ⅰ기흉,병획득열은정적중조내절포취당매.제취기열자낭균광포변충(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)총RNA,통과RT-PCR방법극륭출내절-β-포취당매eg1기인적성숙태편마서렬.채용기인중조적방법구건해기인적파사덕필적효모Pichia pastoris분비형표체재체pPIC9K-eg1,경선성화후채용전천공법장기도입필적효모GS115중,대량사선후획득고효표체내절포취당매Ⅰ적필적효모공정균주GpN24.해균주채용갑순유도120 h후,내절포취당매Ⅰ적활력가체570.7 U/mL,최괄온도위55℃,재90℃적조건하보온30 min후잉구유60%적매활력;최괄pH위5.0,재pH 3.0～5.0적조건하매활력보지은정.도6표2삼16