CAJ | 학술논문

目的:用基因工程方法获取重组人血小板因子4(rhPF4),为下一步基础理论研究和临床应用奠定基础.方法:PCR方法获得人PF4编码序列,克隆入质粒pRSET,构建融合表达载体pRSET-PF4,转化大肠杆菌,以IPTG诱导表达融合的人PF4蛋白,经镍柱亲和层析纯化,SDS-PAGE分析所表达的目的蛋白及纯化后蛋白.结果:成功构建了表达载体pRSET-PF4,DNA序列测定结果与预期结果一致.IPTG诱导表达的rhPF4融合蛋白部分以可溶形式存在,占菌体总蛋白量的11%.亲和层析纯化后目的蛋白纯度为84%.结论:获得原核基因工程表达的rhPF4蛋白.
목적:용기인공정방법획취중조인혈소판인자4(rhPF4),위하일보기출이론연구화림상응용전정기출.방법:PCR방법획득인PF4편마서렬,극륭입질립pRSET,구건융합표체재체pRSET-PF4,전화대장간균,이IPTG유도표체융합적인PF4단백,경얼주친화층석순화,SDS-PAGE분석소표체적목적단백급순화후단백.결과:성공구건료표체재체pRSET-PF4,DNA서렬측정결과여예기결과일치.IPTG유도표체적rhPF4융합단백부분이가용형식존재,점균체총단백량적11%.친화층석순화후목적단백순도위84%.결론:획득원핵기인공정표체적rhPF4단백.