西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2010年
3期
412-414,417
,共4页
肖利佳%王丹%李昌龙%翟芬
肖利佳%王丹%李昌龍%翟芬
초리가%왕단%리창룡%적분
增强型绿色荧光蛋白%起始甲硫氨酸%结构%功能
增彊型綠色熒光蛋白%起始甲硫氨痠%結構%功能
증강형록색형광단백%기시갑류안산%결구%공능
目的 以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)中起始Met为例,初步探索组成EGFP的不同氨基酸对EGFP发光功能的影响,为绿色荧光蛋白的变体改造提供理论基础.方法 运用分子生物学技术去掉质粒pEGFP-N1中编码EGFP的起始氨基酸Met的密码子,将beta-actin的上游的435bp序列引入突变型EGFP阅读框的上游,将此融合型质粒转染A549细胞后,运用一系列检测方法检测融合蛋白的表达水平及转染细胞的的发光强度.结果 突变掉起始Met后,EGFP丧失了发光功能.结论 起始Met对保持EGFP的发光功能有重要作用,提示Met作为绝大多数蛋白质的生物合成起始氨基酸,可能是维持某些蛋白质的正确的空间结构所必须的氨基酸.
目的 以增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)中起始Met為例,初步探索組成EGFP的不同氨基痠對EGFP髮光功能的影響,為綠色熒光蛋白的變體改造提供理論基礎.方法 運用分子生物學技術去掉質粒pEGFP-N1中編碼EGFP的起始氨基痠Met的密碼子,將beta-actin的上遊的435bp序列引入突變型EGFP閱讀框的上遊,將此融閤型質粒轉染A549細胞後,運用一繫列檢測方法檢測融閤蛋白的錶達水平及轉染細胞的的髮光彊度.結果 突變掉起始Met後,EGFP喪失瞭髮光功能.結論 起始Met對保持EGFP的髮光功能有重要作用,提示Met作為絕大多數蛋白質的生物閤成起始氨基痠,可能是維持某些蛋白質的正確的空間結構所必鬚的氨基痠.
목적 이증강형록색형광단백(EGFP)중기시Met위례,초보탐색조성EGFP적불동안기산대EGFP발광공능적영향,위록색형광단백적변체개조제공이론기출.방법 운용분자생물학기술거도질립pEGFP-N1중편마EGFP적기시안기산Met적밀마자,장beta-actin적상유적435bp서렬인입돌변형EGFP열독광적상유,장차융합형질립전염A549세포후,운용일계렬검측방법검측융합단백적표체수평급전염세포적적발광강도.결과 돌변도기시Met후,EGFP상실료발광공능.결론 기시Met대보지EGFP적발광공능유중요작용,제시Met작위절대다수단백질적생물합성기시안기산,가능시유지모사단백질적정학적공간결구소필수적안기산.
