CAJ | 학술논문

目的:探讨在白血病细胞中与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin hemology deleted on chromosome ten gene,PTEN)对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体1(VEGF receptor 1,VEGFR1)调控作用的影响.方法:将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性粒细胞白血病急变细胞株K562,实时荧光定量PCR法检测不同转染组细胞中PTEN、VEGF和VEGF1 mRNA表达水平,Western印迹法检测PTEN、VEGF、Akt和磷酸化Akt蛋白的表达水平,并采用Transwell小室侵袭实验检测不同转染组细胞的侵袭性.通过MTT实验及FCM法检测PTEN基因对脐静脉内皮细胞株ECV304增殖和凋亡的影响.通过鸡胚尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)体内血管生长实验检测PTEN基因对鸡胚血管生成的影响.结果:与空载体腺病毒(Ad-GFP)相比,Ad-PTEN-GFP 转染人白血病细胞K562后,VEGF及其受体的表达被明显抑制,并呈剂量依赖性负相关;同时,Ad-PTEN-GFP 转染后K562细胞侵袭能力明显减弱.PTEN基因转染能够抑制血管内皮细胞ECV304增殖,并促进其细胞凋亡,细胞周期阻滞在S期.PTEN基因转染可明显抑制CAM血管生长.结论:肿瘤抑制基因PTEN能够抑制内皮细胞增殖和白血病细胞侵袭,其作用机制可能是负调控白血病细胞VEGF表达以及抑制肿瘤血管新生.
목적:탐토재백혈병세포중여장력단백동원적10호염색체결실적린산매기인(phosphatase and tensin hemology deleted on chromosome ten gene,PTEN)대혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)급기수체1(VEGF receptor 1,VEGFR1)조공작용적영향.방법:장휴대유야생형PTEN급록색형광단백(green fluorescent protein,GFP)기인적선병독(Ad-PTEN-GFP)급공재체선병독(Ad-GFP)전염인만성립세포백혈병급변세포주K562,실시형광정량PCR법검측불동전염조세포중PTEN、VEGF화VEGF1 mRNA표체수평,Western인적법검측PTEN、VEGF、Akt화린산화Akt단백적표체수평,병채용Transwell소실침습실험검측불동전염조세포적침습성.통과MTT실험급FCM법검측PTEN기인대제정맥내피세포주ECV304증식화조망적영향.통과계배뇨낭막(chick chorioallantoic membrane,CAM)체내혈관생장실험검측PTEN기인대계배혈관생성적영향.결과:여공재체선병독(Ad-GFP)상비,Ad-PTEN-GFP 전염인백혈병세포K562후,VEGF급기수체적표체피명현억제,병정제량의뢰성부상관;동시,Ad-PTEN-GFP 전염후K562세포침습능력명현감약.PTEN기인전염능구억제혈관내피세포ECV304증식,병촉진기세포조망,세포주기조체재S기.PTEN기인전염가명현억제CAM혈관생장.결론:종류억제기인PTEN능구억제내피세포증식화백혈병세포침습,기작용궤제가능시부조공백혈병세포VEGF표체이급억제종류혈관신생.