军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2010年
5期
430-432
,共3页
王双%陈燕侠%王瑞琳%孙志伟%林建波%俞炜源
王雙%陳燕俠%王瑞琳%孫誌偉%林建波%俞煒源
왕쌍%진연협%왕서림%손지위%림건파%유위원
sIL-2Rα%HEK293%瞬时表达
sIL-2Rα%HEK293%瞬時錶達
sIL-2Rα%HEK293%순시표체
目的 在HEK293细胞瞬时表达带有组氨酸标签的重组人sIL-2Rα的胞外功能区片段, 并进行纯化与鉴定.方法 对GenBank中IL-2Rα膜外区基因序列进行优化,并在3′端融合组氨酸标签序列的基因,人工合成该基因并将其克隆到表达载体pL-293;转染HEK293细胞瞬时表达sIL-2Rα;表达产物His标签纯化;SDS-PAGE和Western印迹对表达产物进行鉴定.结果 表达产物中在相对分子质量为48 000处可见与目的 蛋白相对分子质量相符的条带,该条带可被sIL-2Rα单克隆抗体识别.结论 构建的重组sIL-2Rα质粒能够在HEK293细胞瞬时表达,表达量为1~1.5 mg/L.
目的 在HEK293細胞瞬時錶達帶有組氨痠標籤的重組人sIL-2Rα的胞外功能區片段, 併進行純化與鑒定.方法 對GenBank中IL-2Rα膜外區基因序列進行優化,併在3′耑融閤組氨痠標籤序列的基因,人工閤成該基因併將其剋隆到錶達載體pL-293;轉染HEK293細胞瞬時錶達sIL-2Rα;錶達產物His標籤純化;SDS-PAGE和Western印跡對錶達產物進行鑒定.結果 錶達產物中在相對分子質量為48 000處可見與目的 蛋白相對分子質量相符的條帶,該條帶可被sIL-2Rα單剋隆抗體識彆.結論 構建的重組sIL-2Rα質粒能夠在HEK293細胞瞬時錶達,錶達量為1~1.5 mg/L.
목적 재HEK293세포순시표체대유조안산표첨적중조인sIL-2Rα적포외공능구편단, 병진행순화여감정.방법 대GenBank중IL-2Rα막외구기인서렬진행우화,병재3′단융합조안산표첨서렬적기인,인공합성해기인병장기극륭도표체재체pL-293;전염HEK293세포순시표체sIL-2Rα;표체산물His표첨순화;SDS-PAGE화Western인적대표체산물진행감정.결과 표체산물중재상대분자질량위48 000처가견여목적 단백상대분자질량상부적조대,해조대가피sIL-2Rα단극륭항체식별.결론 구건적중조sIL-2Rα질립능구재HEK293세포순시표체,표체량위1~1.5 mg/L.
