兰州大学学报（医学版）
蘭州大學學報（醫學版）
란주대학학보（의학판）
JOURNAL OF LANZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
4期
16-20
,共5页
呼志斌%吴润%刘湘涛%陈建华%赵春林
呼誌斌%吳潤%劉湘濤%陳建華%趙春林
호지빈%오윤%류상도%진건화%조춘림
牛朊蛋白%原核表达%复性%活性分析
牛朊蛋白%原覈錶達%複性%活性分析
우원단백%원핵표체%복성%활성분석
目的 复性黄牛朊蛋白原核表达产物,分析复性蛋白的活性,以获得有活性的牛重组朊蛋白.方法 构建并诱导表达黄牛朊蛋白基因重组菌,复性其包涵体裂解物,对GST-BoPrP(93～241)(Q234R)复性产物进行GSTrap FF柱层析纯化,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹观察其提纯和复性效果.结果 重组菌可表达分子质量约为42.4 ku的目的 蛋白,包涵体裂解物经过透析复性后,可获得较高纯度的复性目的 蛋白.各复性产物和纯化的GST-BoPrP(93～241)(Q234R)蛋白经免疫印迹鉴定,发现仅分子质量约为42.4 ku的条带与单抗4C11结合.结论 获得高纯度复性黄牛朊蛋白原核表达蛋白,具有良好的免疫反应活性.
目的 複性黃牛朊蛋白原覈錶達產物,分析複性蛋白的活性,以穫得有活性的牛重組朊蛋白.方法 構建併誘導錶達黃牛朊蛋白基因重組菌,複性其包涵體裂解物,對GST-BoPrP(93～241)(Q234R)複性產物進行GSTrap FF柱層析純化,通過十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和免疫印跡觀察其提純和複性效果.結果 重組菌可錶達分子質量約為42.4 ku的目的 蛋白,包涵體裂解物經過透析複性後,可穫得較高純度的複性目的 蛋白.各複性產物和純化的GST-BoPrP(93～241)(Q234R)蛋白經免疫印跡鑒定,髮現僅分子質量約為42.4 ku的條帶與單抗4C11結閤.結論 穫得高純度複性黃牛朊蛋白原覈錶達蛋白,具有良好的免疫反應活性.
목적 복성황우원단백원핵표체산물,분석복성단백적활성,이획득유활성적우중조원단백.방법 구건병유도표체황우원단백기인중조균,복성기포함체렬해물,대GST-BoPrP(93～241)(Q234R)복성산물진행GSTrap FF주층석순화,통과십이완기류산납-취병희선알응효전영화면역인적관찰기제순화복성효과.결과 중조균가표체분자질량약위42.4 ku적목적 단백,포함체렬해물경과투석복성후,가획득교고순도적복성목적 단백.각복성산물화순화적GST-BoPrP(93～241)(Q234R)단백경면역인적감정,발현부분자질량약위42.4 ku적조대여단항4C11결합.결론 획득고순도복성황우원단백원핵표체단백,구유량호적면역반응활성.
