重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2011年
22期
2249-2251
,共3页
董微%许群星%韩玉环%尹利荣
董微%許群星%韓玉環%尹利榮
동미%허군성%한옥배%윤리영
胎血%血清%脐静脉%内皮细胞%生物学
胎血%血清%臍靜脈%內皮細胞%生物學
태혈%혈청%제정맥%내피세포%생물학
目的 通过观察以人脐带血血清为主体的培养体系对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)体外培养扩增的影响,探讨人脐带血血清替代动物血清用于培养HUVEC的可行性.方法 将取来的脐带,分成25 cm的两段(A、B段),均采用胰酶消化法分离HUVEC,分别加入DMEM完全培养液A(含20%的脐带血血清)和B(含20%的胎牛血清、20 ng/mL的血管内皮生长因子),并通过传代进行纯化和扩增培养,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察并绘制细胞生长曲线,用免疫组织化学方法对所得细胞进行鉴定,用流式细胞术检测细胞周期.结果 成功建立了以人脐带血血清为主体的培养体系的HUVEC培养扩增的方法,A、B两段脐带HUVEC吸光度无明显差异(P>0.05),免疫组化可见两段HUVEC胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原均呈阳性反应,流式细胞术检测结果显示,A段HUVEC S期的细胞约占35.5%,S+G2+M期的细胞约占48.2%活跃于增殖期,而处于G0/G1期的细胞约占58.3%左右,符合其生长特性.结论 应用灭活脐带血血清培养体系可成功扩增HUVEC,培养的细胞具有HUVEC的基本特性,脐带血血清可在取脐带的同时获得,方法简便,无需购买,为体外研究血管内皮细胞提供了价廉、易行的实验手段.
目的 通過觀察以人臍帶血血清為主體的培養體繫對人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)體外培養擴增的影響,探討人臍帶血血清替代動物血清用于培養HUVEC的可行性.方法 將取來的臍帶,分成25 cm的兩段(A、B段),均採用胰酶消化法分離HUVEC,分彆加入DMEM完全培養液A(含20%的臍帶血血清)和B(含20%的胎牛血清、20 ng/mL的血管內皮生長因子),併通過傳代進行純化和擴增培養,用四甲基偶氮唑藍(MTT)法觀察併繪製細胞生長麯線,用免疫組織化學方法對所得細胞進行鑒定,用流式細胞術檢測細胞週期.結果 成功建立瞭以人臍帶血血清為主體的培養體繫的HUVEC培養擴增的方法,A、B兩段臍帶HUVEC吸光度無明顯差異(P>0.05),免疫組化可見兩段HUVEC胞漿中人第Ⅷ因子相關抗原均呈暘性反應,流式細胞術檢測結果顯示,A段HUVEC S期的細胞約佔35.5%,S+G2+M期的細胞約佔48.2%活躍于增殖期,而處于G0/G1期的細胞約佔58.3%左右,符閤其生長特性.結論 應用滅活臍帶血血清培養體繫可成功擴增HUVEC,培養的細胞具有HUVEC的基本特性,臍帶血血清可在取臍帶的同時穫得,方法簡便,無需購買,為體外研究血管內皮細胞提供瞭價廉、易行的實驗手段.
목적 통과관찰이인제대혈혈청위주체적배양체계대인제정맥내피세포(HUVEC)체외배양확증적영향,탐토인제대혈혈청체대동물혈청용우배양HUVEC적가행성.방법 장취래적제대,분성25 cm적량단(A、B단),균채용이매소화법분리HUVEC,분별가입DMEM완전배양액A(함20%적제대혈혈청)화B(함20%적태우혈청、20 ng/mL적혈관내피생장인자),병통과전대진행순화화확증배양,용사갑기우담서람(MTT)법관찰병회제세포생장곡선,용면역조직화학방법대소득세포진행감정,용류식세포술검측세포주기.결과 성공건립료이인제대혈혈청위주체적배양체계적HUVEC배양확증적방법,A、B량단제대HUVEC흡광도무명현차이(P>0.05),면역조화가견량단HUVEC포장중인제Ⅷ인자상관항원균정양성반응,류식세포술검측결과현시,A단HUVEC S기적세포약점35.5%,S+G2+M기적세포약점48.2%활약우증식기,이처우G0/G1기적세포약점58.3%좌우,부합기생장특성.결론 응용멸활제대혈혈청배양체계가성공확증HUVEC,배양적세포구유HUVEC적기본특성,제대혈혈청가재취제대적동시획득,방법간편,무수구매,위체외연구혈관내피세포제공료개렴、역행적실험수단.
