微生物与感染
微生物與感染
미생물여감염
JOURNAL OF MICROBES AND INFECTION
2011年
2期
78-83
,共6页
林乐勋%赵文然%武帅钦%佟雷%王燕%张凤民%钟照华
林樂勛%趙文然%武帥欽%佟雷%王燕%張鳳民%鐘照華
림악훈%조문연%무수흠%동뢰%왕연%장봉민%종조화
H9c2细胞%B组柯萨奇病毒3型%心肌细胞%骨骼肌细胞%鼠
H9c2細胞%B組柯薩奇病毒3型%心肌細胞%骨骼肌細胞%鼠
H9c2세포%B조가살기병독3형%심기세포%골격기세포%서
H9c2细胞是来源于大鼠胚胎心脏组织的成肌细胞系,B组柯萨奇病毒(group B Coxsackievirus,CVB)是心肌炎和扩张型心肌病的主要病原.本研究观察了CVB3在H9c2细胞中的感染性,探讨H9c2细胞是否可用于CVB致心肌疾病的实验研究.用整合了增强型绿色荧光蛋白(EGFP)或海肾荧光素酶(RLuc)的CVB3重组株EGFP-CVB3、RLuc-CVB3攻击H9c2细胞及大、小鼠原代心肌细胞和骨骼肌细胞,应用荧光显微镜、流式细胞术和化学发光技术观察感染细胞的EGFP和RLuc表达,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测病毒在核酸水平的表达.结果显示,在病毒攻击的H9c2细胞未检测到EGFP和RLuc表达;RT-PCR显示在CVB3感染9 d后检测不到CVB3 RNA;CVB3毒株可感染小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和大鼠心肌细胞,但不感染大鼠骨骼肌细胞和H9c2细胞.本研究结果表明,H9c2细胞不是CVB3易感细胞,不能用于CVB3致心肌疾病的研究;该结果从病毒感染方面也支持H9c2具有大鼠骨骼肌细胞表型.
H9c2細胞是來源于大鼠胚胎心髒組織的成肌細胞繫,B組柯薩奇病毒(group B Coxsackievirus,CVB)是心肌炎和擴張型心肌病的主要病原.本研究觀察瞭CVB3在H9c2細胞中的感染性,探討H9c2細胞是否可用于CVB緻心肌疾病的實驗研究.用整閤瞭增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)或海腎熒光素酶(RLuc)的CVB3重組株EGFP-CVB3、RLuc-CVB3攻擊H9c2細胞及大、小鼠原代心肌細胞和骨骼肌細胞,應用熒光顯微鏡、流式細胞術和化學髮光技術觀察感染細胞的EGFP和RLuc錶達,應用反轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測病毒在覈痠水平的錶達.結果顯示,在病毒攻擊的H9c2細胞未檢測到EGFP和RLuc錶達;RT-PCR顯示在CVB3感染9 d後檢測不到CVB3 RNA;CVB3毒株可感染小鼠心肌細胞、骨骼肌細胞和大鼠心肌細胞,但不感染大鼠骨骼肌細胞和H9c2細胞.本研究結果錶明,H9c2細胞不是CVB3易感細胞,不能用于CVB3緻心肌疾病的研究;該結果從病毒感染方麵也支持H9c2具有大鼠骨骼肌細胞錶型.
H9c2세포시래원우대서배태심장조직적성기세포계,B조가살기병독(group B Coxsackievirus,CVB)시심기염화확장형심기병적주요병원.본연구관찰료CVB3재H9c2세포중적감염성,탐토H9c2세포시부가용우CVB치심기질병적실험연구.용정합료증강형록색형광단백(EGFP)혹해신형광소매(RLuc)적CVB3중조주EGFP-CVB3、RLuc-CVB3공격H9c2세포급대、소서원대심기세포화골격기세포,응용형광현미경、류식세포술화화학발광기술관찰감염세포적EGFP화RLuc표체,응용반전록-취합매련반응(RT-PCR)방법검측병독재핵산수평적표체.결과현시,재병독공격적H9c2세포미검측도EGFP화RLuc표체;RT-PCR현시재CVB3감염9 d후검측불도CVB3 RNA;CVB3독주가감염소서심기세포、골격기세포화대서심기세포,단불감염대서골격기세포화H9c2세포.본연구결과표명,H9c2세포불시CVB3역감세포,불능용우CVB3치심기질병적연구;해결과종병독감염방면야지지H9c2구유대서골격기세포표형.
