CAJ | 학술논문

目的:探讨胶质瘤细胞中的维甲酸合成调控机制,以及维甲酸对人脑胶质瘤细胞SWO-Z2的增殖抑制作用及可能的机制.方法:运用小分子RNA干扰Krüppel 样转录因子9(KLF9);Real-time PCR和Western blotting检测KLF9基因RNAi沉默效率.KLF9基因干扰后,运用Western blotting检测醛脱氢酶1家族成员A1(ALDH1A1)蛋白表达的变化.应用CCK-8法从3种类型维甲酸药物(13-顺维甲酸、9-顺维甲酸和全反式维甲酸分别简称13-cis RA、9-cis RA和ATRA)中筛选出对SWO-Z2细胞活性抑制作用最强的药物.Western blotting检测不同浓度ATRA作用SWO-Z2细胞后增殖相关蛋白cyclin D1、Bcl-2、cleaved PARP以及胶质瘤分化标记物GFAP的表达情况.Real-time PCR检测SWO-Z2细胞的维甲酸受体表达情况.结果:小分子RNA干扰KLF9基因后,成功下调KLF9表达,引起ALDH1A1 mRNA和蛋白表达都下降.3种类型维甲酸中ATRA对SWO-Z2细胞的增殖活性抑制作用最强.ATRA作用SWO-Z2细胞72 h后cleaved PARP蛋白激活,cyclin D1和Bcl-2表达水平下降,而GFAP表达没有改变.SWO-Z2细胞维甲酸受体(RARs)表达降低.结论:KLF9作为ALDH1A1基因的上游调控基因,通过正调控ALDH1A1基因的表达促进胶质瘤细胞中的维甲酸合成;ATRA处理SWO-Z2细胞后未能促进胶质瘤分化而是明显抑制肿瘤细胞增殖能力,可能是由于胶质瘤细胞内缺乏维甲酸受体所致.
목적:탐토효질류세포중적유갑산합성조공궤제,이급유갑산대인뇌효질류세포SWO-Z2적증식억제작용급가능적궤제.방법:운용소분자RNA간우Krüppel 양전록인자9(KLF9);Real-time PCR화Western blotting검측KLF9기인RNAi침묵효솔.KLF9기인간우후,운용Western blotting검측철탈경매1가족성원A1(ALDH1A1)단백표체적변화.응용CCK-8법종3충류형유갑산약물(13-순유갑산、9-순유갑산화전반식유갑산분별간칭13-cis RA、9-cis RA화ATRA)중사선출대SWO-Z2세포활성억제작용최강적약물.Western blotting검측불동농도ATRA작용SWO-Z2세포후증식상관단백cyclin D1、Bcl-2、cleaved PARP이급효질류분화표기물GFAP적표체정황.Real-time PCR검측SWO-Z2세포적유갑산수체표체정황.결과:소분자RNA간우KLF9기인후,성공하조KLF9표체,인기ALDH1A1 mRNA화단백표체도하강.3충류형유갑산중ATRA대SWO-Z2세포적증식활성억제작용최강.ATRA작용SWO-Z2세포72 h후cleaved PARP단백격활,cyclin D1화Bcl-2표체수평하강,이GFAP표체몰유개변.SWO-Z2세포유갑산수체(RARs)표체강저.결론:KLF9작위ALDH1A1기인적상유조공기인,통과정조공ALDH1A1기인적표체촉진효질류세포중적유갑산합성;ATRA처리SWO-Z2세포후미능촉진효질류분화이시명현억제종류세포증식능력,가능시유우효질류세포내결핍유갑산수체소치.