中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2012年
3期
351-356
,共6页
倪琼琼%丁月霞%刘金来%余步云
倪瓊瓊%丁月霞%劉金來%餘步雲
예경경%정월하%류금래%여보운
β溶血性链球菌%htra基因%克隆表达%免疫反应性
β溶血性鏈毬菌%htra基因%剋隆錶達%免疫反應性
β용혈성련구균%htra기인%극륭표체%면역반응성
[目的]了解广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)中htra同源基因的分布并初步探讨其表达蛋白在BHS中的免疫反应性.[方法]运用PCR扩增从患儿分离的44株BHS的htra基因并测序,测序结果与NCBI中已知基因序列进行同源性比对；将测序正确的A组链球菌(GAS) htra基因克隆至原核表达质粒pGEX4T-1,并在E.coli BL21中表达,应用Western blot,以抗GST Rabbit mAb鉴定重组融合蛋白表达,以BHS免疫小鼠抗血清检测目的蛋白的免疫反应性.[结果]44株BHS的htra基因与已知GAS htra基因的一致性均达99％；Weste m blot显示,HtrA融合蛋白可与抗GST Rabbit mAb以及GAS免疫小鼠血清特异性结合,而非A组链球菌及对照组免疫血清则呈阴性结果.[结论]从患儿分离的BHS均携带与GAS相同的htra基因,这与基因库中已知的B组链球菌(GBS)、C组链球菌(GCS)htra序列不符:GAS感染动物后可产生抗HtrA蛋白抗体,可以认为HtrA为GAS的显性免疫原,而尚不能认为非A组链球菌中HtrA为其显性免疫原.
[目的]瞭解廣州市兒童緻嚥炎β溶血性鏈毬菌(BHS)中htra同源基因的分佈併初步探討其錶達蛋白在BHS中的免疫反應性.[方法]運用PCR擴增從患兒分離的44株BHS的htra基因併測序,測序結果與NCBI中已知基因序列進行同源性比對；將測序正確的A組鏈毬菌(GAS) htra基因剋隆至原覈錶達質粒pGEX4T-1,併在E.coli BL21中錶達,應用Western blot,以抗GST Rabbit mAb鑒定重組融閤蛋白錶達,以BHS免疫小鼠抗血清檢測目的蛋白的免疫反應性.[結果]44株BHS的htra基因與已知GAS htra基因的一緻性均達99％；Weste m blot顯示,HtrA融閤蛋白可與抗GST Rabbit mAb以及GAS免疫小鼠血清特異性結閤,而非A組鏈毬菌及對照組免疫血清則呈陰性結果.[結論]從患兒分離的BHS均攜帶與GAS相同的htra基因,這與基因庫中已知的B組鏈毬菌(GBS)、C組鏈毬菌(GCS)htra序列不符:GAS感染動物後可產生抗HtrA蛋白抗體,可以認為HtrA為GAS的顯性免疫原,而尚不能認為非A組鏈毬菌中HtrA為其顯性免疫原.
[목적]료해엄주시인동치인염β용혈성련구균(BHS)중htra동원기인적분포병초보탐토기표체단백재BHS중적면역반응성.[방법]운용PCR확증종환인분리적44주BHS적htra기인병측서,측서결과여NCBI중이지기인서렬진행동원성비대；장측서정학적A조련구균(GAS) htra기인극륭지원핵표체질립pGEX4T-1,병재E.coli BL21중표체,응용Western blot,이항GST Rabbit mAb감정중조융합단백표체,이BHS면역소서항혈청검측목적단백적면역반응성.[결과]44주BHS적htra기인여이지GAS htra기인적일치성균체99％；Weste m blot현시,HtrA융합단백가여항GST Rabbit mAb이급GAS면역소서혈청특이성결합,이비A조련구균급대조조면역혈청칙정음성결과.[결론]종환인분리적BHS균휴대여GAS상동적htra기인,저여기인고중이지적B조련구균(GBS)、C조련구균(GCS)htra서렬불부:GAS감염동물후가산생항HtrA단백항체,가이인위HtrA위GAS적현성면역원,이상불능인위비A조련구균중HtrA위기현성면역원.
