现代医药卫生
現代醫藥衛生
현대의약위생
MODERN MEDICINE HEALTH
2005年
1期
22-23
,共2页
刘琪%安永群%刘念一%李坤碧%韩力苏
劉琪%安永群%劉唸一%李坤碧%韓力囌
류기%안영군%류념일%리곤벽%한력소
霍乱弧菌%CT毒素%快速检测%PCR
霍亂弧菌%CT毒素%快速檢測%PCR
곽란호균%CT독소%쾌속검측%PCR
目的:研究快速、特异、灵敏的检测携带肠毒素基因的霍乱弧菌的聚合酶链法检测技术,应用于突发霍乱疫情现场和各类食品样本中霍乱弧菌的的快速检测.方法:选择霍乱弧菌肠毒素基因上的CTBAB亚单位中稳定区的核苷酸序列制备成霍乱毒素的特异性引物,对O1群(稻叶、小川)、O139群霍乱弧菌标准菌株及本地流行株和60份可疑样本检测,进行PCR实验.通过稀释比较法和定时增菌培养检测法,将PCR方法与培养法、免疫胶体金膜层析法的灵敏性与特异性进行比较.结果:细菌经稀释10-1～10-6以后仍PCR检测阳性,PCR的检测灵敏度为1个DNA考贝.免疫胶体金膜层析法的检测限为106/ml,并存在一定程度的假阳性.霍乱标准菌株均在546bp处出现CTBAB亚单位基因扩增产物,可疑样本均未检测CTBAB亚单位基因产物,与培养结果符合.选择其他肠道传染病病原菌进行特异性实验,证实霍乱弧菌CTBAB亚单位基因引物的特异性,应用常规培养法、一次性快速纸片法、3种方法对60份可疑样本检测证实,PCR方法的特异性与培养法一致,PCR法的特异性超过免疫胶体金膜层析法.检测灵敏度实验该引物对霍乱弧菌的检测敏感基线为1个DNA考贝.结论:该实验整个过程仅需4～6小时,适用于疫情现场对霍乱弧菌的快速仪器检测.
目的:研究快速、特異、靈敏的檢測攜帶腸毒素基因的霍亂弧菌的聚閤酶鏈法檢測技術,應用于突髮霍亂疫情現場和各類食品樣本中霍亂弧菌的的快速檢測.方法:選擇霍亂弧菌腸毒素基因上的CTBAB亞單位中穩定區的覈苷痠序列製備成霍亂毒素的特異性引物,對O1群(稻葉、小川)、O139群霍亂弧菌標準菌株及本地流行株和60份可疑樣本檢測,進行PCR實驗.通過稀釋比較法和定時增菌培養檢測法,將PCR方法與培養法、免疫膠體金膜層析法的靈敏性與特異性進行比較.結果:細菌經稀釋10-1～10-6以後仍PCR檢測暘性,PCR的檢測靈敏度為1箇DNA攷貝.免疫膠體金膜層析法的檢測限為106/ml,併存在一定程度的假暘性.霍亂標準菌株均在546bp處齣現CTBAB亞單位基因擴增產物,可疑樣本均未檢測CTBAB亞單位基因產物,與培養結果符閤.選擇其他腸道傳染病病原菌進行特異性實驗,證實霍亂弧菌CTBAB亞單位基因引物的特異性,應用常規培養法、一次性快速紙片法、3種方法對60份可疑樣本檢測證實,PCR方法的特異性與培養法一緻,PCR法的特異性超過免疫膠體金膜層析法.檢測靈敏度實驗該引物對霍亂弧菌的檢測敏感基線為1箇DNA攷貝.結論:該實驗整箇過程僅需4～6小時,適用于疫情現場對霍亂弧菌的快速儀器檢測.
목적:연구쾌속、특이、령민적검측휴대장독소기인적곽란호균적취합매련법검측기술,응용우돌발곽란역정현장화각류식품양본중곽란호균적적쾌속검측.방법:선택곽란호균장독소기인상적CTBAB아단위중은정구적핵감산서렬제비성곽란독소적특이성인물,대O1군(도협、소천)、O139군곽란호균표준균주급본지류행주화60빈가의양본검측,진행PCR실험.통과희석비교법화정시증균배양검측법,장PCR방법여배양법、면역효체금막층석법적령민성여특이성진행비교.결과:세균경희석10-1～10-6이후잉PCR검측양성,PCR적검측령민도위1개DNA고패.면역효체금막층석법적검측한위106/ml,병존재일정정도적가양성.곽란표준균주균재546bp처출현CTBAB아단위기인확증산물,가의양본균미검측CTBAB아단위기인산물,여배양결과부합.선택기타장도전염병병원균진행특이성실험,증실곽란호균CTBAB아단위기인인물적특이성,응용상규배양법、일차성쾌속지편법、3충방법대60빈가의양본검측증실,PCR방법적특이성여배양법일치,PCR법적특이성초과면역효체금막층석법.검측령민도실험해인물대곽란호균적검측민감기선위1개DNA고패.결론:해실험정개과정부수4～6소시,괄용우역정현장대곽란호균적쾌속의기검측.
