人S100A6-GST融合蛋白的原核表达和纯化
인S100A6-GST융합단백적원핵표체화순화
Expression and purification of human S100A6-GST fusion protein
  • 万方数据
    重庆医科大学学报 중경의과대학학보
    UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
    2007年 10期 1009-1012 ,共4页

    苗静琨%赖天霞%左国伟%李星星%王嫣%蒋薇%何通川%周兰

    묘정곤%뢰천하%좌국위%리성성%왕언%장미%하통천%주란

    人S100A6基因%融合蛋白%原核表达%蛋白纯化 人S100A6基因%融閤蛋白%原覈錶達%蛋白純化
    인S100A6기인%융합단백%원핵표체%단백순화
    目的:制备人S100A6-GST融合蛋白,为研究人S100A6((hS100A6)蛋白的功能奠定基础.方法:从pHAHA-hS100A6中双酶切获取hS100A6基因,亚克隆至原核表达载体pGST-moluc,构建pGST-moluc-hS100A6,转化BL21后,IPTG诱导重组菌表达hS100A6蛋白,SDS-PAGE及Western Blot鉴定表达产物,Glutathion-Sepharose 4B球珠分离纯化.结果:重组菌株表达出与理论预测值相符的一个约36ku的hS100A6融合蛋白,纯化后的融合蛋白的产量为3mg/L菌液,纯度约92%.结论:成功构建了hS100A6-GST原核表达质粒,在大肠杆菌中表达纯化后得到较高浓度的hS100A6-GST融合蛋白,为hS100A6蛋白功能的研究打下了基础.
    목적:제비인S100A6-GST융합단백,위연구인S100A6((hS100A6)단백적공능전정기출.방법:종pHAHA-hS100A6중쌍매절획취hS100A6기인,아극륭지원핵표체재체pGST-moluc,구건pGST-moluc-hS100A6,전화BL21후,IPTG유도중조균표체hS100A6단백,SDS-PAGE급Western Blot감정표체산물,Glutathion-Sepharose 4B구주분리순화.결과:중조균주표체출여이론예측치상부적일개약36ku적hS100A6융합단백,순화후적융합단백적산량위3mg/L균액,순도약92%.결론:성공구건료hS100A6-GST원핵표체질립,재대장간균중표체순화후득도교고농도적hS100A6-GST융합단백,위hS100A6단백공능적연구타하료기출.
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