H-2Kd基因siRNA表达质粒的构建及在小鼠LAK细胞的表达
H-2Kd기인siRNA표체질립적구건급재소서LAK세포적표체
Construction of a plasmid expressing siRNA aimed at the H-2Kd gene and expression of H-2Kd in mouse LAK cells
  • 万方数据
    山东大学学报（医学版） 산동대학학보（의학판）
    JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
    2008年 6期 590-593 ,共4页

    庄学伟%夏西燕%单宁宁%王洪春%张义%杨晓静%李晓丽%赵胜梅%邹雄

    장학위%하서연%단저저%왕홍춘%장의%양효정%리효려%조성매%추웅

    质粒%H-2Kd基因%小干扰RNA 質粒%H-2Kd基因%小榦擾RNA
    질립%H-2Kd기인%소간우RNA
    目的 构建针对BALB/C小鼠H-2Kd基因siRNA表达质粒,观察其在小鼠LAK细胞的表达,为进一步研究H-2Kd基因功能奠定基础.方法 设计siRNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化的pSi-lencer 3.0-H1连接,转化大肠杆菌DH5a扩增纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列.采用siRNA表达质粒封闭小鼠LAK细胞MHC-1(H-2Kd)的表达,同时设空转染组和无关序列组,流式细胞术检测不同组剐靶蛋白的表达.结果 纯化的质粒分子量为2.8Kb,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符,流式细胞术检测证实siRNA能够抑制靶蛋白的表达.结论 成功构建了针对H-2Kd基因的siRNA表达质粒并抑制了其表达.
    목적 구건침대BALB/C소서H-2Kd기인siRNA표체질립,관찰기재소서LAK세포적표체,위진일보연구H-2Kd기인공능전정기출.방법 설계siRNA간섭파서렬,체외합성량단호보적과핵감산,통과여선성화적pSi-lencer 3.0-H1련접,전화대장간균DH5a확증순화득도소수질립,통과경지당응효전영급기인측서감정기분자량급삽입편단적서렬.채용siRNA표체질립봉폐소서LAK세포MHC-1(H-2Kd)적표체,동시설공전염조화무관서렬조,류식세포술검측불동조과파단백적표체.결과 순화적질립분자량위2.8Kb,삽입적과핵감산서렬여설계적서렬완전상부,류식세포술검측증실siRNA능구억제파단백적표체.결론 성공구건료침대H-2Kd기인적siRNA표체질립병억제료기표체.
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