寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2009年
3期
129-133
,共5页
DD-PCR%贝氏奠尼茨绦虫%基因直降%序列分析%EST
DD-PCR%貝氏奠尼茨縚蟲%基因直降%序列分析%EST
DD-PCR%패씨전니자조충%기인직강%서렬분석%EST
本研究以新疆绵羊体内寄生的贝氏莫尼茨绦虫为研究材料,运用mRNA差异显示方法,研究了贝氏莫尼茨绦虫成节和孕节节片间差异基因信息.提取贝氏莫尼茨绦虫成虫成节和孕节的总RNA为模板,以3条Oligo-dT(I,Ⅱ,Ⅲ)锚定引物和8条随机引物配对的24种组合,进行DDRT-PCR扩增.经过8%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后以及银染方法,显示差异DNA条带.凝胶回收差异条带并进行再扩增,琼脂糖电泳检测,得到7个差异片段,经克隆测序及相似性比对,其中有6条均未见有报道,所以其应为新基因.seq16与猪肉绦虫幼虫UNAM-cd2 mRNA同源性达100%,UNAM-cd2 mRNA功能未知,与细粒棘球绦虫胃蛋白酶同源性达100%,与日本血吸虫G-10蛋白同源性达88%,G-10蛋白功能未知,与黑腹果蝇胚胎生殖腺同源性84%.
本研究以新疆綿羊體內寄生的貝氏莫尼茨縚蟲為研究材料,運用mRNA差異顯示方法,研究瞭貝氏莫尼茨縚蟲成節和孕節節片間差異基因信息.提取貝氏莫尼茨縚蟲成蟲成節和孕節的總RNA為模闆,以3條Oligo-dT(I,Ⅱ,Ⅲ)錨定引物和8條隨機引物配對的24種組閤,進行DDRT-PCR擴增.經過8%聚丙烯酰胺凝膠電泳分離後以及銀染方法,顯示差異DNA條帶.凝膠迴收差異條帶併進行再擴增,瓊脂糖電泳檢測,得到7箇差異片段,經剋隆測序及相似性比對,其中有6條均未見有報道,所以其應為新基因.seq16與豬肉縚蟲幼蟲UNAM-cd2 mRNA同源性達100%,UNAM-cd2 mRNA功能未知,與細粒棘毬縚蟲胃蛋白酶同源性達100%,與日本血吸蟲G-10蛋白同源性達88%,G-10蛋白功能未知,與黑腹果蠅胚胎生殖腺同源性84%.
본연구이신강면양체내기생적패씨막니자조충위연구재료,운용mRNA차이현시방법,연구료패씨막니자조충성절화잉절절편간차이기인신식.제취패씨막니자조충성충성절화잉절적총RNA위모판,이3조Oligo-dT(I,Ⅱ,Ⅲ)묘정인물화8조수궤인물배대적24충조합,진행DDRT-PCR확증.경과8%취병희선알응효전영분리후이급은염방법,현시차이DNA조대.응효회수차이조대병진행재확증,경지당전영검측,득도7개차이편단,경극륭측서급상사성비대,기중유6조균미견유보도,소이기응위신기인.seq16여저육조충유충UNAM-cd2 mRNA동원성체100%,UNAM-cd2 mRNA공능미지,여세립극구조충위단백매동원성체100%,여일본혈흡충G-10단백동원성체88%,G-10단백공능미지,여흑복과승배태생식선동원성84%.
