现代食品科技
現代食品科技
현대식품과기
MODERN FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2010年
5期
540-543
,共4页
鲁曦%师宝忠%王彬%石磊
魯晞%師寶忠%王彬%石磊
로희%사보충%왕빈%석뢰
阪崎肠杆菌%环介导恒温扩增%快速检测
阪崎腸桿菌%環介導恆溫擴增%快速檢測
판기장간균%배개도항온확증%쾌속검측
据WHO最新报告显示,乳粉中的阪崎肠杆菌是导致婴幼儿感染和死亡的主要原因之一.FDA于2002年公布了婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌检测的推荐方法,但检测周期长达1周左右,而目抹作复杂,难以满足控制该疾病暴发和传播的需要.DNA环介导等恒扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是-种特异性、灵敏度高、检测时间短的新型基因扩增技术.本文以阪崎肠杆菌为研究对象,建立了一套应用于婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌快速检测方法.针对阪崎肠杆菌16s RNA基因设计4条引物特异性识别靶基因的六个特殊区域,并在63℃进行恒温扩增.实验结果表明,使用该方法能够在5h之内检测出复原乳样品中101 CFU/mL的阪崎肠杆菌.灵敏度可以达到100fg阪崎肠杆菌基因组DNA.应用环介导等温扩增法,克服了传统检测周期长、操作复杂的缺点,不仅能够用于婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌的检测,而且满足了对于婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌快速检测的迫切需要.
據WHO最新報告顯示,乳粉中的阪崎腸桿菌是導緻嬰幼兒感染和死亡的主要原因之一.FDA于2002年公佈瞭嬰幼兒乳粉中阪崎腸桿菌檢測的推薦方法,但檢測週期長達1週左右,而目抹作複雜,難以滿足控製該疾病暴髮和傳播的需要.DNA環介導等恆擴增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技術是-種特異性、靈敏度高、檢測時間短的新型基因擴增技術.本文以阪崎腸桿菌為研究對象,建立瞭一套應用于嬰幼兒乳粉中阪崎腸桿菌快速檢測方法.針對阪崎腸桿菌16s RNA基因設計4條引物特異性識彆靶基因的六箇特殊區域,併在63℃進行恆溫擴增.實驗結果錶明,使用該方法能夠在5h之內檢測齣複原乳樣品中101 CFU/mL的阪崎腸桿菌.靈敏度可以達到100fg阪崎腸桿菌基因組DNA.應用環介導等溫擴增法,剋服瞭傳統檢測週期長、操作複雜的缺點,不僅能夠用于嬰幼兒乳粉中阪崎腸桿菌的檢測,而且滿足瞭對于嬰幼兒乳粉中阪崎腸桿菌快速檢測的迫切需要.
거WHO최신보고현시,유분중적판기장간균시도치영유인감염화사망적주요원인지일.FDA우2002년공포료영유인유분중판기장간균검측적추천방법,단검측주기장체1주좌우,이목말작복잡,난이만족공제해질병폭발화전파적수요.DNA배개도등항확증(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)기술시-충특이성、령민도고、검측시간단적신형기인확증기술.본문이판기장간균위연구대상,건립료일투응용우영유인유분중판기장간균쾌속검측방법.침대판기장간균16s RNA기인설계4조인물특이성식별파기인적륙개특수구역,병재63℃진행항온확증.실험결과표명,사용해방법능구재5h지내검측출복원유양품중101 CFU/mL적판기장간균.령민도가이체도100fg판기장간균기인조DNA.응용배개도등온확증법,극복료전통검측주기장、조작복잡적결점,불부능구용우영유인유분중판기장간균적검측,이차만족료대우영유인유분중판기장간균쾌속검측적박절수요.