中国循证儿科杂志
中國循證兒科雜誌
중국순증인과잡지
CHINESE JOURNAL OF EVIDENCE-BASED PEDIATRICS
2010年
5期
382-385
,共4页
刘秋霞%蔡娇阳%李本尚%汤静燕
劉鞦霞%蔡嬌暘%李本尚%湯靜燕
류추하%채교양%리본상%탕정연
肿瘤干细胞%13-顺维甲酸%分化%神经母细胞瘤%儿童
腫瘤榦細胞%13-順維甲痠%分化%神經母細胞瘤%兒童
종류간세포%13-순유갑산%분화%신경모세포류%인동
目的 体外观察并鉴定13-顺维甲酸诱导神经母细胞瘤(NB)干细胞的分化作用,为临床用维甲酸治疗NB微小残留病灶提供实验依据.方法 取14例伴骨髓转移的Ⅳ期NB患儿的骨髓液标本,分离出NB细胞,将原代肿瘤细胞接种于无血清干细胞培养基中悬浮培养;在含5 μmol·L-1 13-顺维甲酸的分化培养基中培养神经球细胞,观察细胞的形态变化;RT-PCR法检测神经球细胞诱导前、诱导3和9 d Oct-4表达水平的改变;利用细胞免疫荧光技术比较诱导前及诱导9 d神经球细胞nestin表达的差异.结果 14例骨髓标本中,4例分离到原代NB细胞.无血清培养基中培养4～6 d后,可见原代悬浮神经球形成,传代后成球细胞能再次分裂增殖为神经球.神经球细胞在血清培养基中呈贴壁生长,呈三角形或星形,添加5 μmol·L-1 13-顺维甲酸后,细胞生长速度降低,形态发生明显改变.RT-PCR法检测结果显示,13-顺维甲酸诱导9 d后,神经球细胞Oct-4表达水平逐渐降低;细胞免疫荧光显示诱导9 d后神经球细胞nestin表达减弱.结论 13-顺维甲酸能有效诱导NB干细胞分化.
目的 體外觀察併鑒定13-順維甲痠誘導神經母細胞瘤(NB)榦細胞的分化作用,為臨床用維甲痠治療NB微小殘留病竈提供實驗依據.方法 取14例伴骨髓轉移的Ⅳ期NB患兒的骨髓液標本,分離齣NB細胞,將原代腫瘤細胞接種于無血清榦細胞培養基中懸浮培養;在含5 μmol·L-1 13-順維甲痠的分化培養基中培養神經毬細胞,觀察細胞的形態變化;RT-PCR法檢測神經毬細胞誘導前、誘導3和9 d Oct-4錶達水平的改變;利用細胞免疫熒光技術比較誘導前及誘導9 d神經毬細胞nestin錶達的差異.結果 14例骨髓標本中,4例分離到原代NB細胞.無血清培養基中培養4～6 d後,可見原代懸浮神經毬形成,傳代後成毬細胞能再次分裂增殖為神經毬.神經毬細胞在血清培養基中呈貼壁生長,呈三角形或星形,添加5 μmol·L-1 13-順維甲痠後,細胞生長速度降低,形態髮生明顯改變.RT-PCR法檢測結果顯示,13-順維甲痠誘導9 d後,神經毬細胞Oct-4錶達水平逐漸降低;細胞免疫熒光顯示誘導9 d後神經毬細胞nestin錶達減弱.結論 13-順維甲痠能有效誘導NB榦細胞分化.
목적 체외관찰병감정13-순유갑산유도신경모세포류(NB)간세포적분화작용,위림상용유갑산치료NB미소잔류병조제공실험의거.방법 취14례반골수전이적Ⅳ기NB환인적골수액표본,분리출NB세포,장원대종류세포접충우무혈청간세포배양기중현부배양;재함5 μmol·L-1 13-순유갑산적분화배양기중배양신경구세포,관찰세포적형태변화;RT-PCR법검측신경구세포유도전、유도3화9 d Oct-4표체수평적개변;이용세포면역형광기술비교유도전급유도9 d신경구세포nestin표체적차이.결과 14례골수표본중,4례분리도원대NB세포.무혈청배양기중배양4～6 d후,가견원대현부신경구형성,전대후성구세포능재차분렬증식위신경구.신경구세포재혈청배양기중정첩벽생장,정삼각형혹성형,첨가5 μmol·L-1 13-순유갑산후,세포생장속도강저,형태발생명현개변.RT-PCR법검측결과현시,13-순유갑산유도9 d후,신경구세포Oct-4표체수평축점강저;세포면역형광현시유도9 d후신경구세포nestin표체감약.결론 13-순유갑산능유효유도NB간세포분화.
