中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
4期
313-315
,共3页
张健%陈艳%乔传玲%杨焕良%唐续%辛晓光%陈化兰
張健%陳豔%喬傳玲%楊煥良%唐續%辛曉光%陳化蘭
장건%진염%교전령%양환량%당속%신효광%진화란
IL-2%重组腺病毒%基因表达
IL-2%重組腺病毒%基因錶達
IL-2%중조선병독%기인표체
为构建表达猪白细胞介素2(IL-2)的复制缺陷型重组腺病毒,本研究提取经刀豆球蛋白A(con A)刺激体外培养的长白猪外周血淋巴细胞总RNA,利用RT-PCR扩增猪IL-2基因,并克隆于质粒pIRES2-EGFP中,将含有IL-2及EGFP的基因片段亚克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315中,构建重组腺病毒穿梭质粒pDC315-IL-2-EGFP.利用脂质体转染方法将pDC315-IL-2-EGFP和腺病毒骨架质粒pBHGloxΔEl,E3Cre共转染HEK293细胞.根据腺病毒感染后形成的典型细胞病变及EGFP的荧光信号筛选重组腺病毒rAd-IL-2-EGFP.经western blot鉴定,结果表明获得了一株能够表达猪IL-2蛋白的重组腺病毒rAd-IL-2-EGFP.本研究为进一步研究猪IL-2在疫苗免疫中的增强作用及研制新型免疫增强剂奠定了基础.
為構建錶達豬白細胞介素2(IL-2)的複製缺陷型重組腺病毒,本研究提取經刀豆毬蛋白A(con A)刺激體外培養的長白豬外週血淋巴細胞總RNA,利用RT-PCR擴增豬IL-2基因,併剋隆于質粒pIRES2-EGFP中,將含有IL-2及EGFP的基因片段亞剋隆到腺病毒的穿梭質粒pDC315中,構建重組腺病毒穿梭質粒pDC315-IL-2-EGFP.利用脂質體轉染方法將pDC315-IL-2-EGFP和腺病毒骨架質粒pBHGloxΔEl,E3Cre共轉染HEK293細胞.根據腺病毒感染後形成的典型細胞病變及EGFP的熒光信號篩選重組腺病毒rAd-IL-2-EGFP.經western blot鑒定,結果錶明穫得瞭一株能夠錶達豬IL-2蛋白的重組腺病毒rAd-IL-2-EGFP.本研究為進一步研究豬IL-2在疫苗免疫中的增彊作用及研製新型免疫增彊劑奠定瞭基礎.
위구건표체저백세포개소2(IL-2)적복제결함형중조선병독,본연구제취경도두구단백A(con A)자격체외배양적장백저외주혈림파세포총RNA,이용RT-PCR확증저IL-2기인,병극륭우질립pIRES2-EGFP중,장함유IL-2급EGFP적기인편단아극륭도선병독적천사질립pDC315중,구건중조선병독천사질립pDC315-IL-2-EGFP.이용지질체전염방법장pDC315-IL-2-EGFP화선병독골가질립pBHGloxΔEl,E3Cre공전염HEK293세포.근거선병독감염후형성적전형세포병변급EGFP적형광신호사선중조선병독rAd-IL-2-EGFP.경western blot감정,결과표명획득료일주능구표체저IL-2단백적중조선병독rAd-IL-2-EGFP.본연구위진일보연구저IL-2재역묘면역중적증강작용급연제신형면역증강제전정료기출.
