东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
7期
97-101
,共5页
苹果%nptⅡ基因%豇豆胰蛋白酶抑制剂基因%继代培养%稳定性
蘋果%nptⅡ基因%豇豆胰蛋白酶抑製劑基因%繼代培養%穩定性
평과%nptⅡ기인%강두이단백매억제제기인%계대배양%은정성
以常规离体继代培养的转豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cowpea trypsin inhibitor,CpTI)基因苹果(Malus domestica Borkh.)(包括皇家嘎拉、王林、乔纳金和富士等60个株系)组培苗为试材,应用卡那霉素筛选、PCR扩增及RT-PCR扩增对其外源基因的稳定性进行研究.结果表明,在60个常规继代培养6～8年的转CpTI基因苹果转化株系中均可检测出CpTI特异基因片断；除2个转化株系在50 mg·L-1卡那霉素浓度下出现花叶现象,表现缺乏卡那霉素抗性外,其他株系在含相同浓度卡那霉素的培养基中生长正常.RT-PCR检测结果表明,转入的外源CpTI基因在43个株系中得到了较高水平的表达,在15个株系中表达强度低,2个株系未检测到特异表达条带.
以常規離體繼代培養的轉豇豆胰蛋白酶抑製劑(Cowpea trypsin inhibitor,CpTI)基因蘋果(Malus domestica Borkh.)(包括皇傢嘎拉、王林、喬納金和富士等60箇株繫)組培苗為試材,應用卡那黴素篩選、PCR擴增及RT-PCR擴增對其外源基因的穩定性進行研究.結果錶明,在60箇常規繼代培養6～8年的轉CpTI基因蘋果轉化株繫中均可檢測齣CpTI特異基因片斷；除2箇轉化株繫在50 mg·L-1卡那黴素濃度下齣現花葉現象,錶現缺乏卡那黴素抗性外,其他株繫在含相同濃度卡那黴素的培養基中生長正常.RT-PCR檢測結果錶明,轉入的外源CpTI基因在43箇株繫中得到瞭較高水平的錶達,在15箇株繫中錶達彊度低,2箇株繫未檢測到特異錶達條帶.
이상규리체계대배양적전강두이단백매억제제(Cowpea trypsin inhibitor,CpTI)기인평과(Malus domestica Borkh.)(포괄황가알랍、왕림、교납금화부사등60개주계)조배묘위시재,응용잡나매소사선、PCR확증급RT-PCR확증대기외원기인적은정성진행연구.결과표명,재60개상규계대배양6～8년적전CpTI기인평과전화주계중균가검측출CpTI특이기인편단；제2개전화주계재50 mg·L-1잡나매소농도하출현화협현상,표현결핍잡나매소항성외,기타주계재함상동농도잡나매소적배양기중생장정상.RT-PCR검측결과표명,전입적외원CpTI기인재43개주계중득도료교고수평적표체,재15개주계중표체강도저,2개주계미검측도특이표체조대.
