上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2011年
7期
869-874
,共6页
罗云蔓%黄莉莉%刘伯玉%张彦%胡宝瑜%朱平%郭晓奎%何平%姜叙诚
囉雲蔓%黃莉莉%劉伯玉%張彥%鬍寶瑜%硃平%郭曉奎%何平%薑敘誠
라운만%황리리%류백옥%장언%호보유%주평%곽효규%하평%강서성
钩端螺旋体%巨噬细胞%活性%实时荧光定量PCR
鉤耑螺鏇體%巨噬細胞%活性%實時熒光定量PCR
구단라선체%거서세포%활성%실시형광정량PCR
目的 通过比较钩端螺旋体(钩体)在人和小鼠单核-巨噬细胞内的存活情况,探讨固有免疫在钩端螺旋体病致病机制中的作用.方法 将钩体秋季血清群强毒株56606v株及其经体外多次传代的弱毒株56606a株在体外分别感染经佛波酯(PMA)诱导分化的人单核细胞系THP-1和小鼠单核-巨噬细胞系RAW264.7.感染后2、24、72 h,采用免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察并计算两种细胞的含菌细胞百分数；感染后2、12、24、48和72 h,采用Real-Time PCR技术定量检测可间接反映细胞内钩体存活数量的钩体16S rRNA的表达.结果 随着感染时间的延长,两种细胞的含菌细胞百分数逐渐降低；Real-Time PCR检测结果显示:随着感染时间的延长,两种细胞内钩体16S rRNA的表达逐渐下调,细胞内钩体的存活数量逐渐减少.结论 钩体在人和小鼠单核-巨噬细胞内均不能存活和繁殖,提示致病性钩体通过抗巨噬细胞的杀灭降解而在胞内的存活和繁殖可能不是钩体感染人类宿主的主要致病途径,其发病机制有待进一步阐明.
目的 通過比較鉤耑螺鏇體(鉤體)在人和小鼠單覈-巨噬細胞內的存活情況,探討固有免疫在鉤耑螺鏇體病緻病機製中的作用.方法 將鉤體鞦季血清群彊毒株56606v株及其經體外多次傳代的弱毒株56606a株在體外分彆感染經彿波酯(PMA)誘導分化的人單覈細胞繫THP-1和小鼠單覈-巨噬細胞繫RAW264.7.感染後2、24、72 h,採用免疫熒光染色激光共聚焦顯微鏡觀察併計算兩種細胞的含菌細胞百分數；感染後2、12、24、48和72 h,採用Real-Time PCR技術定量檢測可間接反映細胞內鉤體存活數量的鉤體16S rRNA的錶達.結果 隨著感染時間的延長,兩種細胞的含菌細胞百分數逐漸降低；Real-Time PCR檢測結果顯示:隨著感染時間的延長,兩種細胞內鉤體16S rRNA的錶達逐漸下調,細胞內鉤體的存活數量逐漸減少.結論 鉤體在人和小鼠單覈-巨噬細胞內均不能存活和繁殖,提示緻病性鉤體通過抗巨噬細胞的殺滅降解而在胞內的存活和繁殖可能不是鉤體感染人類宿主的主要緻病途徑,其髮病機製有待進一步闡明.
목적 통과비교구단라선체(구체)재인화소서단핵-거서세포내적존활정황,탐토고유면역재구단라선체병치병궤제중적작용.방법 장구체추계혈청군강독주56606v주급기경체외다차전대적약독주56606a주재체외분별감염경불파지(PMA)유도분화적인단핵세포계THP-1화소서단핵-거서세포계RAW264.7.감염후2、24、72 h,채용면역형광염색격광공취초현미경관찰병계산량충세포적함균세포백분수；감염후2、12、24、48화72 h,채용Real-Time PCR기술정량검측가간접반영세포내구체존활수량적구체16S rRNA적표체.결과 수착감염시간적연장,량충세포적함균세포백분수축점강저；Real-Time PCR검측결과현시:수착감염시간적연장,량충세포내구체16S rRNA적표체축점하조,세포내구체적존활수량축점감소.결론 구체재인화소서단핵-거서세포내균불능존활화번식,제시치병성구체통과항거서세포적살멸강해이재포내적존활화번식가능불시구체감염인류숙주적주요치병도경,기발병궤제유대진일보천명.
