中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2011年
11期
1065-1070
,共6页
萧梅芳%戴霞红%周蓉蓉%刘建平%章保新%赵树山%范学工
蕭梅芳%戴霞紅%週蓉蓉%劉建平%章保新%趙樹山%範學工
소매방%대하홍%주용용%류건평%장보신%조수산%범학공
高迁移率族蛋白1%分离纯化%HepG2细胞%U937细胞
高遷移率族蛋白1%分離純化%HepG2細胞%U937細胞
고천이솔족단백1%분리순화%HepG2세포%U937세포
目的:分离纯化肝细胞HepG2与免疫细胞U937分泌的高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),并加以鉴定.方法:体外培养人肝细胞HepG2与免疫细胞U937,采用400 ng/mL的脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)刺激20 h后收集细胞培养液上清.采用超滤浓缩,阳离子交换层析,阴离子交换层析,Sephadex G75凝胶过滤层析结合免疫沉淀的方法,进行分离纯化；聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)及Western印迹进行蛋白分子质量及性质鉴定.结果:2株细胞分离纯化得到的蛋白经SDS-PAGE鉴定其纯度达90％以上,分子质量约为26 kD,Western印迹鉴定为HMGB1.结论:该纯化方法可获得纯度较高的HMGB1.
目的:分離純化肝細胞HepG2與免疫細胞U937分泌的高遷移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),併加以鑒定.方法:體外培養人肝細胞HepG2與免疫細胞U937,採用400 ng/mL的脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)刺激20 h後收集細胞培養液上清.採用超濾濃縮,暘離子交換層析,陰離子交換層析,Sephadex G75凝膠過濾層析結閤免疫沉澱的方法,進行分離純化；聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDSPAGE)及Western印跡進行蛋白分子質量及性質鑒定.結果:2株細胞分離純化得到的蛋白經SDS-PAGE鑒定其純度達90％以上,分子質量約為26 kD,Western印跡鑒定為HMGB1.結論:該純化方法可穫得純度較高的HMGB1.
목적:분리순화간세포HepG2여면역세포U937분비적고천이솔족단백1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),병가이감정.방법:체외배양인간세포HepG2여면역세포U937,채용400 ng/mL적지다당( lipopolysaccharide,LPS)자격20 h후수집세포배양액상청.채용초려농축,양리자교환층석,음리자교환층석,Sephadex G75응효과려층석결합면역침정적방법,진행분리순화；취병희선알응효전영(SDSPAGE)급Western인적진행단백분자질량급성질감정.결과:2주세포분리순화득도적단백경SDS-PAGE감정기순도체90％이상,분자질량약위26 kD,Western인적감정위HMGB1.결론:해순화방법가획득순도교고적HMGB1.
