中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2003年
8期
77-82
,共6页
赵亚华%徐伟%蔡家伟%胡康%廖富频%黄自然
趙亞華%徐偉%蔡傢偉%鬍康%廖富頻%黃自然
조아화%서위%채가위%호강%료부빈%황자연
抗菌肽AD 表达载体pPICZα-A GS115 表达效价
抗菌肽AD 錶達載體pPICZα-A GS115 錶達效價
항균태AD 표체재체pPICZα-A GS115 표체효개
通过PCR方法使抗菌肽AD基因中带有XhoⅠ和XbaⅠ酶切位点序列,再克隆到表达载体pPICZα-A中,重组表达载体转化GS115,经重组酵母菌表达的抗菌肽AD,其N端去除了其它氨基酸.对重组抗菌肽培养条件进行优化,在YEPD中含葡萄糖2%,pH为7.5,重组酵母菌培养30h后,0.5%甲醇诱导42h,杀菌效价达1.843,是改造前的3.1倍.最后重组抗菌肽经CM-cellulose 23柱层析得到纯化.
通過PCR方法使抗菌肽AD基因中帶有XhoⅠ和XbaⅠ酶切位點序列,再剋隆到錶達載體pPICZα-A中,重組錶達載體轉化GS115,經重組酵母菌錶達的抗菌肽AD,其N耑去除瞭其它氨基痠.對重組抗菌肽培養條件進行優化,在YEPD中含葡萄糖2%,pH為7.5,重組酵母菌培養30h後,0.5%甲醇誘導42h,殺菌效價達1.843,是改造前的3.1倍.最後重組抗菌肽經CM-cellulose 23柱層析得到純化.
통과PCR방법사항균태AD기인중대유XhoⅠ화XbaⅠ매절위점서렬,재극륭도표체재체pPICZα-A중,중조표체재체전화GS115,경중조효모균표체적항균태AD,기N단거제료기타안기산.대중조항균태배양조건진행우화,재YEPD중함포도당2%,pH위7.5,중조효모균배양30h후,0.5%갑순유도42h,살균효개체1.843,시개조전적3.1배.최후중조항균태경CM-cellulose 23주층석득도순화.
