第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2008年
5期
382-385
,共4页
伏建峰%曹红卫%王宁%刘鑫%杨东%郑新川%鲁永玲%郑江
伏建峰%曹紅衛%王寧%劉鑫%楊東%鄭新川%魯永玲%鄭江
복건봉%조홍위%왕저%류흠%양동%정신천%로영령%정강
黄芩%内毒素%生物传感器%大孔吸附树脂
黃芩%內毒素%生物傳感器%大孔吸附樹脂
황금%내독소%생물전감기%대공흡부수지
目的 从黄芩中提取具有拮抗内毒素(LPS)活性的物质.方法 采用大孔吸附树脂和高效液相色谱(HPLC)等技术将黄芩水提物分离成若干组分,应用生物传感器技术检测各组分与LPS的活性中心Lipid A的结合活性,动态比浊法鲎试验检测各组分(2.0 mg/L)对LPS(02 μg/L)的中和作用,籍此筛选出活性组分;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测所筛组分对LPS诱导的RAW264.7细胞的Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的影响,ELISA法检测所筛组分对LPS(100 μg/L)刺激的RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子的影响.结果 获得5种HPLC产物S3K1～5,其中S3K1与Lipid A结合活性最高,S3K1(2.0 mg/L)可显著抑制LPS(0.2 μg/L)介导的鲎试剂的凝结反应(P<0.05);以LPS(100 μg/L)刺激RAW264.7细胞,其TLR4 mRNA表达增强,给予40、80、160 mg/L的S3K1预处理后能减弱LPS诱导RAW264.7细胞的TLR4 mRNA表达(P<0.05);单纯LPS刺激RAW264.7细胞释放的TNF-α为(1 757.61±207.25)ng/L(对照组),给予40、80、160 mg/L的S3K1预处理后TNF-α浓度依次为(1324.53±149.73)、(893.87±140.77)、(799.97±124.21) ng/L,随S3K1剂量递增而减低,均显著低于对照组(P<0.05).结论 从黄芩中提取到具有拮抗LPS活性的组分S3K1,S3K1在体外对LPS具有一定的中和作用,可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的,TLR4 mRNA表达,进而抑制LPS诱导的RAW264.7细胞活化.
目的 從黃芩中提取具有拮抗內毒素(LPS)活性的物質.方法 採用大孔吸附樹脂和高效液相色譜(HPLC)等技術將黃芩水提物分離成若榦組分,應用生物傳感器技術檢測各組分與LPS的活性中心Lipid A的結閤活性,動態比濁法鱟試驗檢測各組分(2.0 mg/L)對LPS(02 μg/L)的中和作用,籍此篩選齣活性組分;逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)檢測所篩組分對LPS誘導的RAW264.7細胞的Toll樣受體4(TLR4)mRNA錶達的影響,ELISA法檢測所篩組分對LPS(100 μg/L)刺激的RAW264.7細胞釋放腫瘤壞死因子的影響.結果 穫得5種HPLC產物S3K1～5,其中S3K1與Lipid A結閤活性最高,S3K1(2.0 mg/L)可顯著抑製LPS(0.2 μg/L)介導的鱟試劑的凝結反應(P<0.05);以LPS(100 μg/L)刺激RAW264.7細胞,其TLR4 mRNA錶達增彊,給予40、80、160 mg/L的S3K1預處理後能減弱LPS誘導RAW264.7細胞的TLR4 mRNA錶達(P<0.05);單純LPS刺激RAW264.7細胞釋放的TNF-α為(1 757.61±207.25)ng/L(對照組),給予40、80、160 mg/L的S3K1預處理後TNF-α濃度依次為(1324.53±149.73)、(893.87±140.77)、(799.97±124.21) ng/L,隨S3K1劑量遞增而減低,均顯著低于對照組(P<0.05).結論 從黃芩中提取到具有拮抗LPS活性的組分S3K1,S3K1在體外對LPS具有一定的中和作用,可抑製LPS誘導的RAW264.7細胞的,TLR4 mRNA錶達,進而抑製LPS誘導的RAW264.7細胞活化.
목적 종황금중제취구유길항내독소(LPS)활성적물질.방법 채용대공흡부수지화고효액상색보(HPLC)등기술장황금수제물분리성약간조분,응용생물전감기기술검측각조분여LPS적활성중심Lipid A적결합활성,동태비탁법후시험검측각조분(2.0 mg/L)대LPS(02 μg/L)적중화작용,적차사선출활성조분;역전록취합매련식반응(RT-PCR)검측소사조분대LPS유도적RAW264.7세포적Toll양수체4(TLR4)mRNA표체적영향,ELISA법검측소사조분대LPS(100 μg/L)자격적RAW264.7세포석방종류배사인자적영향.결과 획득5충HPLC산물S3K1～5,기중S3K1여Lipid A결합활성최고,S3K1(2.0 mg/L)가현저억제LPS(0.2 μg/L)개도적후시제적응결반응(P<0.05);이LPS(100 μg/L)자격RAW264.7세포,기TLR4 mRNA표체증강,급여40、80、160 mg/L적S3K1예처리후능감약LPS유도RAW264.7세포적TLR4 mRNA표체(P<0.05);단순LPS자격RAW264.7세포석방적TNF-α위(1 757.61±207.25)ng/L(대조조),급여40、80、160 mg/L적S3K1예처리후TNF-α농도의차위(1324.53±149.73)、(893.87±140.77)、(799.97±124.21) ng/L,수S3K1제량체증이감저,균현저저우대조조(P<0.05).결론 종황금중제취도구유길항LPS활성적조분S3K1,S3K1재체외대LPS구유일정적중화작용,가억제LPS유도적RAW264.7세포적,TLR4 mRNA표체,진이억제LPS유도적RAW264.7세포활화.
