西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2008年
4期
47-51
,共5页
翁伟平%张鸯%郭挺伟%靳亚平%秦新喜
翁偉平%張鴦%郭挺偉%靳亞平%秦新喜
옹위평%장앙%곽정위%근아평%진신희
LRF%融合蛋白%表达条件%优化%纯化
LRF%融閤蛋白%錶達條件%優化%純化
LRF%융합단백%표체조건%우화%순화
优化GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中的表达条件,并对其表达产物进行纯化.通过改变诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度等条件,SDS-PAGE电泳分析以确定GST-LRF融合蛋白表达的最佳条件.并通过Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱和电洗脱法纯化目的蛋白.结果表明:重组质粒转化菌E.coli BL21(DE3)在37℃、0.1 mmol/L IPTG诱导5 h时,GST-LRF融合蛋白表达量最高,经电洗脱法纯化得到了 GST-LRF融合蛋白.已确定GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌的最佳表达条件,并纯化得到目的蛋白,为进一步制备抗LRF的单克隆抗体及LRF功能的研究奠定了基础.
優化GST-LRF融閤蛋白在大腸桿菌E.coli BL21(DE3)中的錶達條件,併對其錶達產物進行純化.通過改變誘導溫度、誘導時間及誘導劑濃度等條件,SDS-PAGE電泳分析以確定GST-LRF融閤蛋白錶達的最佳條件.併通過Glutathione Sepharose 4B親和層析柱和電洗脫法純化目的蛋白.結果錶明:重組質粒轉化菌E.coli BL21(DE3)在37℃、0.1 mmol/L IPTG誘導5 h時,GST-LRF融閤蛋白錶達量最高,經電洗脫法純化得到瞭 GST-LRF融閤蛋白.已確定GST-LRF融閤蛋白在大腸桿菌的最佳錶達條件,併純化得到目的蛋白,為進一步製備抗LRF的單剋隆抗體及LRF功能的研究奠定瞭基礎.
우화GST-LRF융합단백재대장간균E.coli BL21(DE3)중적표체조건,병대기표체산물진행순화.통과개변유도온도、유도시간급유도제농도등조건,SDS-PAGE전영분석이학정GST-LRF융합단백표체적최가조건.병통과Glutathione Sepharose 4B친화층석주화전세탈법순화목적단백.결과표명:중조질립전화균E.coli BL21(DE3)재37℃、0.1 mmol/L IPTG유도5 h시,GST-LRF융합단백표체량최고,경전세탈법순화득도료 GST-LRF융합단백.이학정GST-LRF융합단백재대장간균적최가표체조건,병순화득도목적단백,위진일보제비항LRF적단극륭항체급LRF공능적연구전정료기출.
