国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2009年
12期
2278-2282
,共5页
樊廷俊%赵君%王晶%丛日山%杨秀霞%史伟云%王宜强
樊廷俊%趙君%王晶%叢日山%楊秀霞%史偉雲%王宜彊
번정준%조군%왕정%총일산%양수하%사위운%왕의강
人角膜内皮细胞%去上皮层修饰羊膜%组织工程人角膜内皮%新西兰兔%角膜内皮移植
人角膜內皮細胞%去上皮層脩飾羊膜%組織工程人角膜內皮%新西蘭兔%角膜內皮移植
인각막내피세포%거상피층수식양막%조직공정인각막내피%신서란토%각막내피이식
目的:验证体外重建组织工程人角膜内皮(TE-HCE)在角膜内皮移植中的作用.方法:以非转染人角膜内皮细胞(HCE细胞)为种子细胞,以去上皮层修饰羊膜为载体支架体外重建的TE-HCE,经CM-DiI标记后对撕除内皮层和后弹力层(DM)的新西兰兔进行了兔穿透性角膜内皮移植.用裂隙灯显微镜观察移植眼角膜的透明度.用荧光显微镜观察种子细胞荧光标记.用茜素红染色和冰冻切片HE染色和扫描电镜观察种子细胞的形态、细胞连接的形成情况、细胞单层的完整性及其与DM结合的紧密程度.用透射电镜方法鉴定种子细胞、DM和角膜的超微结构.结果:TE-HCE可使新西兰兔角膜保持透明39d以上.角膜内皮层移植区的细胞均带有CM-DiI荧光标记.绝大多数种子细胞为六角形,细胞间连接紧密,重建出了完整的角膜内皮层,且内皮层与DM结合紧密.种子细胞重建出了连续的角膜内皮层,种子细胞、DM和角膜的形态结构与正常对照眼的几乎相同.结论:移植后的TE-HCE在种子细胞形态、连续单层状态、细胞连接形成及超微结构上均与对照兔眼的角膜内皮类似,使移植新西兰兔角膜长期保持透明.
目的:驗證體外重建組織工程人角膜內皮(TE-HCE)在角膜內皮移植中的作用.方法:以非轉染人角膜內皮細胞(HCE細胞)為種子細胞,以去上皮層脩飾羊膜為載體支架體外重建的TE-HCE,經CM-DiI標記後對撕除內皮層和後彈力層(DM)的新西蘭兔進行瞭兔穿透性角膜內皮移植.用裂隙燈顯微鏡觀察移植眼角膜的透明度.用熒光顯微鏡觀察種子細胞熒光標記.用茜素紅染色和冰凍切片HE染色和掃描電鏡觀察種子細胞的形態、細胞連接的形成情況、細胞單層的完整性及其與DM結閤的緊密程度.用透射電鏡方法鑒定種子細胞、DM和角膜的超微結構.結果:TE-HCE可使新西蘭兔角膜保持透明39d以上.角膜內皮層移植區的細胞均帶有CM-DiI熒光標記.絕大多數種子細胞為六角形,細胞間連接緊密,重建齣瞭完整的角膜內皮層,且內皮層與DM結閤緊密.種子細胞重建齣瞭連續的角膜內皮層,種子細胞、DM和角膜的形態結構與正常對照眼的幾乎相同.結論:移植後的TE-HCE在種子細胞形態、連續單層狀態、細胞連接形成及超微結構上均與對照兔眼的角膜內皮類似,使移植新西蘭兔角膜長期保持透明.
목적:험증체외중건조직공정인각막내피(TE-HCE)재각막내피이식중적작용.방법:이비전염인각막내피세포(HCE세포)위충자세포,이거상피층수식양막위재체지가체외중건적TE-HCE,경CM-DiI표기후대시제내피층화후탄력층(DM)적신서란토진행료토천투성각막내피이식.용렬극등현미경관찰이식안각막적투명도.용형광현미경관찰충자세포형광표기.용천소홍염색화빙동절편HE염색화소묘전경관찰충자세포적형태、세포련접적형성정황、세포단층적완정성급기여DM결합적긴밀정도.용투사전경방법감정충자세포、DM화각막적초미결구.결과:TE-HCE가사신서란토각막보지투명39d이상.각막내피층이식구적세포균대유CM-DiI형광표기.절대다수충자세포위륙각형,세포간련접긴밀,중건출료완정적각막내피층,차내피층여DM결합긴밀.충자세포중건출료련속적각막내피층,충자세포、DM화각막적형태결구여정상대조안적궤호상동.결론:이식후적TE-HCE재충자세포형태、련속단층상태、세포련접형성급초미결구상균여대조토안적각막내피유사,사이식신서란토각막장기보지투명.
