生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2010年
1期
54-57,79
,共5页
张鹏%林福玉%张迎梅%杨晓
張鵬%林福玉%張迎梅%楊曉
장붕%림복옥%장영매%양효
血管平滑肌%原代培养%胶原酶%小鼠
血管平滑肌%原代培養%膠原酶%小鼠
혈관평활기%원대배양%효원매%소서
目的:血管平滑肌细胞在人类心血管疾病中具有重要的作用,而作为重要的遗传学研究模式生物的小鼠血管平滑肌材料有限,因此建立一种简单高效的小鼠血管平滑肌原代细胞分离培养方法很重要.方法:分离小鼠主动脉中膜层,胶原酶消化法获得原代平滑肌细胞,免疫荧光方法检测细胞的纯度和分化状态;分离平滑肌细胞特异的报告小鼠的平滑肌细胞,LacZ染色鉴定.结果:用该方法分离的原代平滑肌细胞生长迅速,3 d后即可达5×106个.免疫荧光显示,细胞传至第3代后纯度在98%以上,细胞传至8代分化状态没有改变.LacZ染色鉴定报告小鼠分离的3代平滑肌细胞98%以上显示特异的蓝染.两种实验证明,应用此方法分离原代平滑肌细胞可以满足平滑肌体外功能实验的需求.结论:与传统的组织块培养法相比,该方法操作简便、经济,可以获得更多高纯度的血管平滑肌细胞.
目的:血管平滑肌細胞在人類心血管疾病中具有重要的作用,而作為重要的遺傳學研究模式生物的小鼠血管平滑肌材料有限,因此建立一種簡單高效的小鼠血管平滑肌原代細胞分離培養方法很重要.方法:分離小鼠主動脈中膜層,膠原酶消化法穫得原代平滑肌細胞,免疫熒光方法檢測細胞的純度和分化狀態;分離平滑肌細胞特異的報告小鼠的平滑肌細胞,LacZ染色鑒定.結果:用該方法分離的原代平滑肌細胞生長迅速,3 d後即可達5×106箇.免疫熒光顯示,細胞傳至第3代後純度在98%以上,細胞傳至8代分化狀態沒有改變.LacZ染色鑒定報告小鼠分離的3代平滑肌細胞98%以上顯示特異的藍染.兩種實驗證明,應用此方法分離原代平滑肌細胞可以滿足平滑肌體外功能實驗的需求.結論:與傳統的組織塊培養法相比,該方法操作簡便、經濟,可以穫得更多高純度的血管平滑肌細胞.
목적:혈관평활기세포재인류심혈관질병중구유중요적작용,이작위중요적유전학연구모식생물적소서혈관평활기재료유한,인차건립일충간단고효적소서혈관평활기원대세포분리배양방법흔중요.방법:분리소서주동맥중막층,효원매소화법획득원대평활기세포,면역형광방법검측세포적순도화분화상태;분리평활기세포특이적보고소서적평활기세포,LacZ염색감정.결과:용해방법분리적원대평활기세포생장신속,3 d후즉가체5×106개.면역형광현시,세포전지제3대후순도재98%이상,세포전지8대분화상태몰유개변.LacZ염색감정보고소서분리적3대평활기세포98%이상현시특이적람염.량충실험증명,응용차방법분리원대평활기세포가이만족평활기체외공능실험적수구.결론:여전통적조직괴배양법상비,해방법조작간편、경제,가이획득경다고순도적혈관평활기세포.
