CAJ | 학술논문

目的:通过制备GFP小鼠和B6小鼠坐骨神经横断伤模型.应用免疫组化技术以及RealTime-PCR技术观察和分析周围神经损伤后远侧段组织的形态学及相关因子表达变化.方法:制备GFP小鼠坐骨神经横断伤模型.应用免疫组化技术分别染色S100蛋白以显示施万细胞,染色NF蛋白以显示轴突;结合GFP小鼠的自发荧光以及Hoechst核染观察横断伤后不同时间点远侧段组织的形态学变化.制备B6小鼠坐骨神经横断伤模型,应用RealTime-PCR技术检测横断伤后远侧段组织l中相关营养因子BDNF、NGF、CNTF及抗凋亡因子Bcl-2 mRLNA的表达变化.结果:坐骨神经横断伤后.远侧段施万细胞S100蛋白的表达第7天时达到高峰,第14天时下降,形成狭长细胞索带;第21～28天时仅少数细胞S100蛋白阳性.远侧段NF免疫组化产物于横断伤后第7天时断裂呈碎片状.第28天时碎片亦基本消失不见.远侧段非特异核染数目随损伤时间延长而增加.同时,在远侧段整个溃变过程中,神经基膜管结构仍然可见.坐骨神经横断伤后,BDNFmBLNA表达第1～3周内逐渐上调,其中第3周时达到高峰(P＜0.01),第4周时下降到与正常值相比无统计学意义的水平.NGF mRNA表达第1周时达到高峰(P＜0.01).第2周时比第.1周有小幅下降,但仍然具有统计学意义(P＜0.01),第二周以后下降到与正常值相似的水平.CNTF mRNA表达则在损伤后第l周时下降了35%.第2周时继续下降到正常水平的42.7%.其下降均具有统计学意义(P＜0.01),第3周时有所回升,第4周时下降到低点.Bcl-2 mRNA表达在损伤后第l周时下降.第2、3周时上升,第3周时达到高峰,并且上升具有统计学意义(P＜0.01).结论:坐骨神经横断伤后4周,远饲段神经组织中神经基膜管结构仍然存在.神经营养因子BDNF、NGF、CNIFmRNA的表达时相不同,提示其表达调控机制不同.Bcl-2 mRNA表达变化与施万细胞凋亡相关.
목적:통과제비GFP소서화B6소서좌골신경횡단상모형.응용면역조화기술이급RealTime-PCR기술관찰화분석주위신경손상후원측단조직적형태학급상관인자표체변화.방법:제비GFP소서좌골신경횡단상모형.응용면역조화기술분별염색S100단백이현시시만세포,염색NF단백이현시축돌;결합GFP소서적자발형광이급Hoechst핵염관찰횡단상후불동시간점원측단조직적형태학변화.제비B6소서좌골신경횡단상모형,응용RealTime-PCR기술검측횡단상후원측단조직l중상관영양인자BDNF、NGF、CNTF급항조망인자Bcl-2 mRLNA적표체변화.결과:좌골신경횡단상후.원측단시만세포S100단백적표체제7천시체도고봉,제14천시하강,형성협장세포색대;제21～28천시부소수세포S100단백양성.원측단NF면역조화산물우횡단상후제7천시단렬정쇄편상.제28천시쇄편역기본소실불견.원측단비특이핵염수목수손상시간연장이증가.동시,재원측단정개궤변과정중,신경기막관결구잉연가견.좌골신경횡단상후,BDNFmBLNA표체제1～3주내축점상조,기중제3주시체도고봉(P＜0.01),제4주시하강도여정상치상비무통계학의의적수평.NGF mRNA표체제1주시체도고봉(P＜0.01).제2주시비제.1주유소폭하강,단잉연구유통계학의의(P＜0.01),제이주이후하강도여정상치상사적수평.CNTF mRNA표체칙재손상후제l주시하강료35%.제2주시계속하강도정상수평적42.7%.기하강균구유통계학의의(P＜0.01),제3주시유소회승,제4주시하강도저점.Bcl-2 mRNA표체재손상후제l주시하강.제2、3주시상승,제3주시체도고봉,병차상승구유통계학의의(P＜0.01).결론:좌골신경횡단상후4주,원사단신경조직중신경기막관결구잉연존재.신경영양인자BDNF、NGF、CNIFmRNA적표체시상불동,제시기표체조공궤제불동.Bcl-2 mRNA표체변화여시만세포조망상관.