中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2006年
9期
936-939
,共4页
骨骼肌源性干细胞%碱性成纤维细胞生长因子%表皮生长因子%培养
骨骼肌源性榦細胞%堿性成纖維細胞生長因子%錶皮生長因子%培養
골격기원성간세포%감성성섬유세포생장인자%표피생장인자%배양
目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)单独及联合应用对骨骼肌源性干细胞(muscle derived stem cells, MDSCs)生长的影响. 方法 取出生24 h内的昆明小鼠15只,采用连续预贴壁法从小鼠后肢肌分离培养MDSCs,用含2%胎牛血清的DMEM培养基促进其向骨骼肌细胞分化.取原代MDSCs及MDSCs分化细胞,采用免疫细胞化学染色检测干细胞标志Sca-1和骨骼肌细胞标志α-Sarcomeric肌动蛋白的表达.HE染色观察细胞肌管形成.MTT比色法检测不同浓度(6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 ng/ml)的bFGF和EGF单独应用96 h对MDSCs增殖的影响以及二者(100.00 ng/ml)联合作用24 、48 、72 和96 h对MDSCs增殖的影响. 结果 从新生小鼠后肢肌成功分离培养MDSCs,免疫细胞化学染色90%以上的MDSCs呈Sca-1阳性,分化形成的肌管呈α-Sarcomeric肌动蛋白阳性.HE染色可见肌管形成.bFGF、EGF对MDSCs的促增殖效应随浓度的增加而增加.与阴性对照组比较,bFGF于12.50 ng/ml出现促增殖效应(P＜0.05);25.00 ng/ml组与12.50 ng/ml组比较,作用提高(P＜0.01);50.00、100.00 ng/ml组较25.00 ng/ml组无明显提升(P＞0.05);EGF的作用与bFGF类似,但于50.00 ng/ml时趋于饱和.与阴性对照组比较,EGF于72 h、bFGF于96 h表现促增殖效应(P＜0.01),而二者联合应用于24 h即表现促增殖效应(P＜0.01),并于48、72和96 h增殖效应均较单独应用显著提高(P＜0.05). 结论 bFGF和EGF都能促进MDSCs的增殖,联合作用更快、更强.
目的 觀察堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和錶皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)單獨及聯閤應用對骨骼肌源性榦細胞(muscle derived stem cells, MDSCs)生長的影響. 方法 取齣生24 h內的昆明小鼠15隻,採用連續預貼壁法從小鼠後肢肌分離培養MDSCs,用含2%胎牛血清的DMEM培養基促進其嚮骨骼肌細胞分化.取原代MDSCs及MDSCs分化細胞,採用免疫細胞化學染色檢測榦細胞標誌Sca-1和骨骼肌細胞標誌α-Sarcomeric肌動蛋白的錶達.HE染色觀察細胞肌管形成.MTT比色法檢測不同濃度(6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 ng/ml)的bFGF和EGF單獨應用96 h對MDSCs增殖的影響以及二者(100.00 ng/ml)聯閤作用24 、48 、72 和96 h對MDSCs增殖的影響. 結果 從新生小鼠後肢肌成功分離培養MDSCs,免疫細胞化學染色90%以上的MDSCs呈Sca-1暘性,分化形成的肌管呈α-Sarcomeric肌動蛋白暘性.HE染色可見肌管形成.bFGF、EGF對MDSCs的促增殖效應隨濃度的增加而增加.與陰性對照組比較,bFGF于12.50 ng/ml齣現促增殖效應(P＜0.05);25.00 ng/ml組與12.50 ng/ml組比較,作用提高(P＜0.01);50.00、100.00 ng/ml組較25.00 ng/ml組無明顯提升(P＞0.05);EGF的作用與bFGF類似,但于50.00 ng/ml時趨于飽和.與陰性對照組比較,EGF于72 h、bFGF于96 h錶現促增殖效應(P＜0.01),而二者聯閤應用于24 h即錶現促增殖效應(P＜0.01),併于48、72和96 h增殖效應均較單獨應用顯著提高(P＜0.05). 結論 bFGF和EGF都能促進MDSCs的增殖,聯閤作用更快、更彊.
목적 관찰감성성섬유세포생장인자(basic fibroblast growth factor,bFGF)화표피생장인자(epidermal growth factor,EGF)단독급연합응용대골격기원성간세포(muscle derived stem cells, MDSCs)생장적영향. 방법 취출생24 h내적곤명소서15지,채용련속예첩벽법종소서후지기분리배양MDSCs,용함2%태우혈청적DMEM배양기촉진기향골격기세포분화.취원대MDSCs급MDSCs분화세포,채용면역세포화학염색검측간세포표지Sca-1화골격기세포표지α-Sarcomeric기동단백적표체.HE염색관찰세포기관형성.MTT비색법검측불동농도(6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 ng/ml)적bFGF화EGF단독응용96 h대MDSCs증식적영향이급이자(100.00 ng/ml)연합작용24 、48 、72 화96 h대MDSCs증식적영향. 결과 종신생소서후지기성공분리배양MDSCs,면역세포화학염색90%이상적MDSCs정Sca-1양성,분화형성적기관정α-Sarcomeric기동단백양성.HE염색가견기관형성.bFGF、EGF대MDSCs적촉증식효응수농도적증가이증가.여음성대조조비교,bFGF우12.50 ng/ml출현촉증식효응(P＜0.05);25.00 ng/ml조여12.50 ng/ml조비교,작용제고(P＜0.01);50.00、100.00 ng/ml조교25.00 ng/ml조무명현제승(P＞0.05);EGF적작용여bFGF유사,단우50.00 ng/ml시추우포화.여음성대조조비교,EGF우72 h、bFGF우96 h표현촉증식효응(P＜0.01),이이자연합응용우24 h즉표현촉증식효응(P＜0.01),병우48、72화96 h증식효응균교단독응용현저제고(P＜0.05). 결론 bFGF화EGF도능촉진MDSCs적증식,연합작용경쾌、경강.
