广西农业生物科学
廣西農業生物科學
엄서농업생물과학
JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE
2007年
z1期
12-15,21
,共5页
梁甜%齐向辉%韦旭钦%韦宇拓%黄日波
樑甜%齊嚮輝%韋旭欽%韋宇拓%黃日波
량첨%제향휘%위욱흠%위우탁%황일파
丘状乳杆菌%激活因子%1,3-丙二醇%二醇脱水酶%克隆
丘狀乳桿菌%激活因子%1,3-丙二醇%二醇脫水酶%剋隆
구상유간균%격활인자%1,3-병이순%이순탈수매%극륭
以丘状乳杆菌(Lactobacillus collinoides)基因组DNA为模版,通过PCR方法得到二醇脱水酶激活因子基因pduGH,连接到表达载体pET30a上,得到重组质粒pETpduGH.将此重组质粒转化到Escherichia.coli Rosseta(DE3)中进行表达,重组菌株SDS-PAGE结果显示有明显的64.5 ku和12.4 ku两条特异性蛋白.表达的目的蛋白大多为不溶性的包涵体,经变性、复性后得到部分可溶性蛋白.在辅酶B12,ATP,Mg2+或Mn2+存在下,以Clostridium pasteurianum甘油脱水酶为对象进行激活实验,结果证实,重组质粒pET-pduGH的表达产物具有甘油脱水酶激活活性.
以丘狀乳桿菌(Lactobacillus collinoides)基因組DNA為模版,通過PCR方法得到二醇脫水酶激活因子基因pduGH,連接到錶達載體pET30a上,得到重組質粒pETpduGH.將此重組質粒轉化到Escherichia.coli Rosseta(DE3)中進行錶達,重組菌株SDS-PAGE結果顯示有明顯的64.5 ku和12.4 ku兩條特異性蛋白.錶達的目的蛋白大多為不溶性的包涵體,經變性、複性後得到部分可溶性蛋白.在輔酶B12,ATP,Mg2+或Mn2+存在下,以Clostridium pasteurianum甘油脫水酶為對象進行激活實驗,結果證實,重組質粒pET-pduGH的錶達產物具有甘油脫水酶激活活性.
이구상유간균(Lactobacillus collinoides)기인조DNA위모판,통과PCR방법득도이순탈수매격활인자기인pduGH,련접도표체재체pET30a상,득도중조질립pETpduGH.장차중조질립전화도Escherichia.coli Rosseta(DE3)중진행표체,중조균주SDS-PAGE결과현시유명현적64.5 ku화12.4 ku량조특이성단백.표체적목적단백대다위불용성적포함체,경변성、복성후득도부분가용성단백.재보매B12,ATP,Mg2+혹Mn2+존재하,이Clostridium pasteurianum감유탈수매위대상진행격활실험,결과증실,중조질립pET-pduGH적표체산물구유감유탈수매격활활성.
