中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2008年
2期
179-181
,共3页
李兵%申社林%李朝争%郭靠山%李建广
李兵%申社林%李朝爭%郭靠山%李建廣
리병%신사림%리조쟁%곽고산%리건엄
P21WAF1/CIP1%启动子%pGL3-basic 载体%荧光素酶
P21WAF1/CIP1%啟動子%pGL3-basic 載體%熒光素酶
P21WAF1/CIP1%계동자%pGL3-basic 재체%형광소매
目的:构建含人P21WAF1/CIP1基因启动子的表达载体pGL3- P21p.方法:以全血总RNA为模板,经RT-PCR扩增P21WAF1/CIP1基因启动子,并将其克隆到T-easy载体,测序分析,然后经酶切再克隆到pGL3-basic,构成重组真核表达载体pGL3- P21p.将pGL3- P21p转染到乳腺癌细胞株MCF7中,并检测细胞中荧光素酶的活性.结果:经测序、酶切等检测证实重组真核表达载体pGL3- P21p构建成功,荧光素酶活性检测显示P21WAF1/CIP1基因启动子对荧光酶基因表达起到了正调控作用.结论:P21WAF1/CIP1启动子荧光素酶真核表达载体的成功构建为进一步研究P21WAF1/CIP1基因启动子的表达调控奠定了基础.
目的:構建含人P21WAF1/CIP1基因啟動子的錶達載體pGL3- P21p.方法:以全血總RNA為模闆,經RT-PCR擴增P21WAF1/CIP1基因啟動子,併將其剋隆到T-easy載體,測序分析,然後經酶切再剋隆到pGL3-basic,構成重組真覈錶達載體pGL3- P21p.將pGL3- P21p轉染到乳腺癌細胞株MCF7中,併檢測細胞中熒光素酶的活性.結果:經測序、酶切等檢測證實重組真覈錶達載體pGL3- P21p構建成功,熒光素酶活性檢測顯示P21WAF1/CIP1基因啟動子對熒光酶基因錶達起到瞭正調控作用.結論:P21WAF1/CIP1啟動子熒光素酶真覈錶達載體的成功構建為進一步研究P21WAF1/CIP1基因啟動子的錶達調控奠定瞭基礎.
목적:구건함인P21WAF1/CIP1기인계동자적표체재체pGL3- P21p.방법:이전혈총RNA위모판,경RT-PCR확증P21WAF1/CIP1기인계동자,병장기극륭도T-easy재체,측서분석,연후경매절재극륭도pGL3-basic,구성중조진핵표체재체pGL3- P21p.장pGL3- P21p전염도유선암세포주MCF7중,병검측세포중형광소매적활성.결과:경측서、매절등검측증실중조진핵표체재체pGL3- P21p구건성공,형광소매활성검측현시P21WAF1/CIP1기인계동자대형광매기인표체기도료정조공작용.결론:P21WAF1/CIP1계동자형광소매진핵표체재체적성공구건위진일보연구P21WAF1/CIP1기인계동자적표체조공전정료기출.
