中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2008年
3期
293-297
,共5页
赵舒武%高英茂%汪涛%王晓玲%张静
趙舒武%高英茂%汪濤%王曉玲%張靜
조서무%고영무%왕도%왕효령%장정
促红细胞生成素%神经干细胞%缺氧
促紅細胞生成素%神經榦細胞%缺氧
촉홍세포생성소%신경간세포%결양
目的 观察外源性EPO对神经干细胞缺氧性损伤的保护作用,为缺氧缺血性脑损伤的治疗提供新思路.方法 从孕11.5d(E11.5d)大鼠获得神经干细胞,经无血清培养基悬浮培养并传代,对所获细胞的自我增殖、自我更新及其多分化潜能进行检测.取传3代神经干细胞中添加不同剂量的EPO,在5%O2培养箱中培养120h.通过计数干细胞克隆形成率和MTT法检测神经干细胞的增殖情况.于含血清分化培养基中加入不同剂量的EPO,用NSE和GFAP免疫细胞化学染色观察神经干细胞的分化情况.采用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色,激光扫描共聚焦显微镜观察、检测细胞凋亡率.结果 加入EPO后神经干细胞的克隆形成率和MTT检测的OD值显著增高,细胞凋亡率显著下降,NSE阳性细胞的比例明显升高,其作用随剂量增加而增大,50U/ml时作用最大.结论 EPO对神经干细胞缺氧性损伤具有明显的保护作用,并可促进神经干细胞向神经元方向分化.EPO的这种作用随剂量增加而增大,50U/ml时达高峰.
目的 觀察外源性EPO對神經榦細胞缺氧性損傷的保護作用,為缺氧缺血性腦損傷的治療提供新思路.方法 從孕11.5d(E11.5d)大鼠穫得神經榦細胞,經無血清培養基懸浮培養併傳代,對所穫細胞的自我增殖、自我更新及其多分化潛能進行檢測.取傳3代神經榦細胞中添加不同劑量的EPO,在5%O2培養箱中培養120h.通過計數榦細胞剋隆形成率和MTT法檢測神經榦細胞的增殖情況.于含血清分化培養基中加入不同劑量的EPO,用NSE和GFAP免疫細胞化學染色觀察神經榦細胞的分化情況.採用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色,激光掃描共聚焦顯微鏡觀察、檢測細胞凋亡率.結果 加入EPO後神經榦細胞的剋隆形成率和MTT檢測的OD值顯著增高,細胞凋亡率顯著下降,NSE暘性細胞的比例明顯升高,其作用隨劑量增加而增大,50U/ml時作用最大.結論 EPO對神經榦細胞缺氧性損傷具有明顯的保護作用,併可促進神經榦細胞嚮神經元方嚮分化.EPO的這種作用隨劑量增加而增大,50U/ml時達高峰.
목적 관찰외원성EPO대신경간세포결양성손상적보호작용,위결양결혈성뇌손상적치료제공신사로.방법 종잉11.5d(E11.5d)대서획득신경간세포,경무혈청배양기현부배양병전대,대소획세포적자아증식、자아경신급기다분화잠능진행검측.취전3대신경간세포중첨가불동제량적EPO,재5%O2배양상중배양120h.통과계수간세포극륭형성솔화MTT법검측신경간세포적증식정황.우함혈청분화배양기중가입불동제량적EPO,용NSE화GFAP면역세포화학염색관찰신경간세포적분화정황.채용Annexin Ⅴ-FITC/PI염색,격광소묘공취초현미경관찰、검측세포조망솔.결과 가입EPO후신경간세포적극륭형성솔화MTT검측적OD치현저증고,세포조망솔현저하강,NSE양성세포적비례명현승고,기작용수제량증가이증대,50U/ml시작용최대.결론 EPO대신경간세포결양성손상구유명현적보호작용,병가촉진신경간세포향신경원방향분화.EPO적저충작용수제량증가이증대,50U/ml시체고봉.