解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2009年
1期
103-107
,共5页
徐存拴%邢雪琨%谢来峰%张明%方方%崔胜男%王磊%张富春
徐存拴%邢雪琨%謝來峰%張明%方方%崔勝男%王磊%張富春
서존전%형설곤%사래봉%장명%방방%최성남%왕뢰%장부춘
肝脏%绿色荧光蛋白%液压转基因技术%大鼠
肝髒%綠色熒光蛋白%液壓轉基因技術%大鼠
간장%록색형광단백%액압전기인기술%대서
目的 探讨液压转基因技术(HDT)应用于大鼠肝脏转基因的条件、方法. 方法 以不同速度从大鼠尾静脉注射不同体积、浓度的含绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP-C1,于注射后不同时间取大鼠(各4只)各肝叶制备冷冻切片,在波长488nm的荧光显微镜下观察、计数各肝叶的绿色荧光蛋白表达情况. 结果 在一次性注射浓度为30mg/L质粒、注射速度为2ml/s、注射体积为大鼠体重9%的条件下,注射pEGFP-C1质粒后6h,绿色荧光蛋白阳性细胞比例最高,占肝脏总细胞的20%以上,从24h起绿色荧光蛋白的表达量逐渐减少,至72h时各肝叶均基本难以检出绿色荧光蛋白阳性细胞.在上述最佳条件下,绿色荧光蛋白在各肝叶的表达情况是:蒂状叶的绿色荧光蛋白阳性细胞约为30%,左叶、中叶、右叶约为20%,尾状叶约为10%. 结论 液压转基因技术可应用于大鼠肝脏转基因,其适宜条件是:质粒溶液的浓度为30mg/L,注射量为大鼠体重的9%,注射速度为2ml/s,观察转染率的适宜时间是转基因后6～24h.
目的 探討液壓轉基因技術(HDT)應用于大鼠肝髒轉基因的條件、方法. 方法 以不同速度從大鼠尾靜脈註射不同體積、濃度的含綠色熒光蛋白基因質粒pEGFP-C1,于註射後不同時間取大鼠(各4隻)各肝葉製備冷凍切片,在波長488nm的熒光顯微鏡下觀察、計數各肝葉的綠色熒光蛋白錶達情況. 結果 在一次性註射濃度為30mg/L質粒、註射速度為2ml/s、註射體積為大鼠體重9%的條件下,註射pEGFP-C1質粒後6h,綠色熒光蛋白暘性細胞比例最高,佔肝髒總細胞的20%以上,從24h起綠色熒光蛋白的錶達量逐漸減少,至72h時各肝葉均基本難以檢齣綠色熒光蛋白暘性細胞.在上述最佳條件下,綠色熒光蛋白在各肝葉的錶達情況是:蒂狀葉的綠色熒光蛋白暘性細胞約為30%,左葉、中葉、右葉約為20%,尾狀葉約為10%. 結論 液壓轉基因技術可應用于大鼠肝髒轉基因,其適宜條件是:質粒溶液的濃度為30mg/L,註射量為大鼠體重的9%,註射速度為2ml/s,觀察轉染率的適宜時間是轉基因後6～24h.
목적 탐토액압전기인기술(HDT)응용우대서간장전기인적조건、방법. 방법 이불동속도종대서미정맥주사불동체적、농도적함록색형광단백기인질립pEGFP-C1,우주사후불동시간취대서(각4지)각간협제비냉동절편,재파장488nm적형광현미경하관찰、계수각간협적록색형광단백표체정황. 결과 재일차성주사농도위30mg/L질립、주사속도위2ml/s、주사체적위대서체중9%적조건하,주사pEGFP-C1질립후6h,록색형광단백양성세포비례최고,점간장총세포적20%이상,종24h기록색형광단백적표체량축점감소,지72h시각간협균기본난이검출록색형광단백양성세포.재상술최가조건하,록색형광단백재각간협적표체정황시:체상협적록색형광단백양성세포약위30%,좌협、중협、우협약위20%,미상협약위10%. 결론 액압전기인기술가응용우대서간장전기인,기괄의조건시:질립용액적농도위30mg/L,주사량위대서체중적9%,주사속도위2ml/s,관찰전염솔적괄의시간시전기인후6～24h.
