CAJ | 학술논문

目的重组hTGF-β1腺病毒(adeno-hTGF-β1)转染的BMSCs在体内成软骨能力的初步研究,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性.方法重组adenc-hTGF-β1转染猪BMSCs,酶联免疫吸附定量检测(ELISA法)重组腺病毒转染hTGF-β1蛋白的表达.然后消化收集重组腺病毒转染后的BMSCs,均匀接种于圆盘状PGA支架上,对照组转染adeno-LacZ,然后植入裸鼠背部皮下,在植入后第3周取材,分别行大体观察、组织学、Ⅱ型胶原免疫组化和蛋白聚糖含量检测对形成组织进行评价.结果 ELISA结果显示adeno-hTGF-β1转染的BMSCs,其hTGF-β1表达量是转染adeno-lacZ的BMSCs 2.65倍(P<0.05).植入裸鼠体内后3周取材,实验组HE染色观察可见有软骨形成,但较不均匀,并被纤维组织分割,形成的软骨组织区域可见软骨细胞包埋在软骨陷窝内;对照组可见仅有少量软骨形成,被大量的纤维组织和未降解的PGA支架包裹,实验组和对照组形成软骨占总组织百分比,分别为(41.83±4.64)%和(17.50±2.85)%,P<0.05.Safranin'O染色显示,实验组形成的软骨组织区域都有被染成桔红色蛋白多糖类基质分泌,着色比对照组更深.实验组形成的软骨组织区域有大量棕黄色的Ⅱ型胶原颗粒,而对照组仅有少量的棕黄色的Ⅱ型胶原颗粒,实验组形成的软骨组织中的蛋白聚糖含量多于正常猪耳软骨.结论重组hTGF-β1腺病毒转染BMSCs作为种子细胞,在裸鼠体内能促使软骨组织形成,从而为hTGF-β1基因转染的BMSCs在软骨组织工程应用中奠定了基础.
목적 중조hTGF-β1선병독(adeno-hTGF-β1)전염적BMSCs재체내성연골능력적초보연구,탐토기작위조직공정화연골적충자세포적가행성.방법 중조adenc-hTGF-β1전염저BMSCs,매련면역흡부정량검측(ELISA법)중조선병독전염hTGF-β1단백적표체.연후소화수집중조선병독전염후적BMSCs,균균접충우원반상PGA지가상,대조조전염adeno-LacZ,연후식입라서배부피하,재식입후제3주취재,분별행대체관찰、조직학、Ⅱ형효원면역조화화단백취당함량검측대형성조직진행평개.결과 ELISA결과 현시adeno-hTGF-β1전염적BMSCs,기hTGF-β1표체량시전염adeno-lacZ적BMSCs 2.65배(P<0.05).식입라서체내후3주취재,실험조HE염색관찰가견유연골형성,단교불균균,병피섬유조직분할,형성적연골조직구역가견연골세포포매재연골함와내;대조조가견부유소량연골형성,피대량적섬유조직화미강해적PGA지가포과,실험조화대조조형성연골점총조직백분비,분별위(41.83±4.64)%화(17.50±2.85)%,P<0.05.Safranin'O염색현시,실험조형성적연골조직구역도유피염성길홍색단백다당류기질분비,착색비대조조경심.실험조형성적연골조직구역유대량종황색적Ⅱ형효원과립,이대조조부유소량적종황색적Ⅱ형효원과립,실험조형성적연골조직중적단백취당함량다우정상저이연골.결론 중조hTGF-β1선병독전염BMSCs작위충자세포,재라서체내능촉사연골조직형성,종이위hTGF-β1기인전염적BMSCs재연골조직공정응용중전정료기출.