中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2011年
7期
568-574
,共7页
白晶%钟小宁%唐海娟%何志义%张建全%邓静敏
白晶%鐘小寧%唐海娟%何誌義%張建全%鄧靜敏
백정%종소저%당해연%하지의%장건전%산정민
整合素%A549细胞%ERK1/2(细胞外信号调节激酶1/2)
整閤素%A549細胞%ERK1/2(細胞外信號調節激酶1/2)
정합소%A549세포%ERK1/2(세포외신호조절격매1/2)
背景与目的近年研究显示整合素α5β1作为整合素家族的重要部分与非小细胞肺癌的转移性、浸润性和低分化趋向密切相关.本研究应用整合素α5/β1 siRNA双链及ERK抑制剂PD98095干预人肺癌细胞A549,探讨整合素α5β1蛋白表达对A549细胞生长和迁移能力的影响及其细胞内信号转导机制.方法实验分为未转染组、脂质体组、整合素α5β1 siRNA染组和PD98095组四组.采用免疫印迹(Western blot)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测A549中整合素α5β1蛋白和mRNA表达水平,Western blot检测A549中ERK1/2、MMP-9和caspase-3蛋白水平,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和Annexin-V FITC PI双染色法检测A549增殖和凋亡.结果整合素α5/β1 siRNA双链在抑制α5/β1蛋白和mRNA表达的同时,可以下调ERK的mRNA和蛋白表达,并抑制其磷酸化水平.整合素α5/β1 siRNA双链和PD98059均可以明显抑制A549细胞的增殖,促进细胞凋亡和细胞内caspase-3蛋白表达,并抑制细胞内MMP-9蛋白表达.结论整合素α5β1可能通过介导的ERK信号转导通路参与了A549细胞的增殖和迁移调控.
揹景與目的近年研究顯示整閤素α5β1作為整閤素傢族的重要部分與非小細胞肺癌的轉移性、浸潤性和低分化趨嚮密切相關.本研究應用整閤素α5/β1 siRNA雙鏈及ERK抑製劑PD98095榦預人肺癌細胞A549,探討整閤素α5β1蛋白錶達對A549細胞生長和遷移能力的影響及其細胞內信號轉導機製.方法實驗分為未轉染組、脂質體組、整閤素α5β1 siRNA染組和PD98095組四組.採用免疫印跡(Western blot)和逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測A549中整閤素α5β1蛋白和mRNA錶達水平,Western blot檢測A549中ERK1/2、MMP-9和caspase-3蛋白水平,四甲基偶氮唑鹽比色(MTT)法和Annexin-V FITC PI雙染色法檢測A549增殖和凋亡.結果整閤素α5/β1 siRNA雙鏈在抑製α5/β1蛋白和mRNA錶達的同時,可以下調ERK的mRNA和蛋白錶達,併抑製其燐痠化水平.整閤素α5/β1 siRNA雙鏈和PD98059均可以明顯抑製A549細胞的增殖,促進細胞凋亡和細胞內caspase-3蛋白錶達,併抑製細胞內MMP-9蛋白錶達.結論整閤素α5β1可能通過介導的ERK信號轉導通路參與瞭A549細胞的增殖和遷移調控.
배경여목적근년연구현시정합소α5β1작위정합소가족적중요부분여비소세포폐암적전이성、침윤성화저분화추향밀절상관.본연구응용정합소α5/β1 siRNA쌍련급ERK억제제PD98095간예인폐암세포A549,탐토정합소α5β1단백표체대A549세포생장화천이능력적영향급기세포내신호전도궤제.방법실험분위미전염조、지질체조、정합소α5β1 siRNA염조화PD98095조사조.채용면역인적(Western blot)화역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측A549중정합소α5β1단백화mRNA표체수평,Western blot검측A549중ERK1/2、MMP-9화caspase-3단백수평,사갑기우담서염비색(MTT)법화Annexin-V FITC PI쌍염색법검측A549증식화조망.결과정합소α5/β1 siRNA쌍련재억제α5/β1단백화mRNA표체적동시,가이하조ERK적mRNA화단백표체,병억제기린산화수평.정합소α5/β1 siRNA쌍련화PD98059균가이명현억제A549세포적증식,촉진세포조망화세포내caspase-3단백표체,병억제세포내MMP-9단백표체.결론정합소α5β1가능통과개도적ERK신호전도통로삼여료A549세포적증식화천이조공.
