CAJ | 학술논문

本研究探索转化生长因子-β1 (TGF-β1)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)增殖、细胞外基质(ECM)表达和基因表达的影响.采用植块法从人脐带中分离、培养hUC-MSC并进行表型鉴定,用WST法检测不同浓度的TGF-β1对hUC-MSC增殖的影响,利用qRT-PCR和免疫组织化学方法检测不同浓度的TGF-β1对hUC-MSC细胞外基质表达的影响,利用表达基因芯片技术检测hUC-MSC在TGF-β1作用下基因表达谱的变化.结果表明,细胞增殖实验中0.1 - 20.0 ng/ml TGF-β1浓度条件下培养24、48和72小时,hUC-MSC增殖能力变化均不显著,但在0.1 ng/ml组均会出现相对峰值.0.5 ng/ml的TGF-β1促进Col-Ⅰ、MMP-2、MMP-9和TIMP-2的mRNA表达达到峰值;而0.1 ng/ml的TGF-β1促进其它成分:Col-Ⅳ、FN、LN、Integrin、Tenascin-C、MMP-1和TIMP-1的mRNA表达达到峰值.0.5和0.1 ng/ml的TGF-β1分别促进Col-Ⅰ和Col-Ⅳ少量表达,均促进FN强烈表达,但均不能使LN明显表达.基因芯片结果显示,在上调基因中有9个基因与细胞运动、迁移相关;Pathway和Go的统计分析显示,差异基因涉及转录、翻译、生物合成、代谢、信号转导、细胞迁移、细胞间连接等多方面.结论:0.1 ng/ml的TGF-β1能较好地促进hUC-MSC的生长.不同浓度的TGF-β1能分别促进ECM不同成分表达,TGF-β1对hUC-MSC的转录、翻译、生物合成、代谢、信号转导、细胞迁移、细胞间连接等多方面在基因水平上具有调节作用.
본연구탐색전화생장인자-β1 (TGF-β1)대인제대간충질간세포(hUC-MSC)증식、세포외기질(ECM)표체화기인표체적영향.채용식괴법종인제대중분리、배양hUC-MSC병진행표형감정,용WST법검측불동농도적TGF-β1대hUC-MSC증식적영향,이용qRT-PCR화면역조직화학방법검측불동농도적TGF-β1대hUC-MSC세포외기질표체적영향,이용표체기인심편기술검측hUC-MSC재TGF-β1작용하기인표체보적변화.결과표명,세포증식실험중0.1 - 20.0 ng/ml TGF-β1농도조건하배양24、48화72소시,hUC-MSC증식능력변화균불현저,단재0.1 ng/ml조균회출현상대봉치.0.5 ng/ml적TGF-β1촉진Col-Ⅰ、MMP-2、MMP-9화TIMP-2적mRNA표체체도봉치;이0.1 ng/ml적TGF-β1촉진기타성분:Col-Ⅳ、FN、LN、Integrin、Tenascin-C、MMP-1화TIMP-1적mRNA표체체도봉치.0.5화0.1 ng/ml적TGF-β1분별촉진Col-Ⅰ화Col-Ⅳ소량표체,균촉진FN강렬표체,단균불능사LN명현표체.기인심편결과현시,재상조기인중유9개기인여세포운동、천이상관;Pathway화Go적통계분석현시,차이기인섭급전록、번역、생물합성、대사、신호전도、세포천이、세포간련접등다방면.결론:0.1 ng/ml적TGF-β1능교호지촉진hUC-MSC적생장.불동농도적TGF-β1능분별촉진ECM불동성분표체,TGF-β1대hUC-MSC적전록、번역、생물합성、대사、신호전도、세포천이、세포간련접등다방면재기인수평상구유조절작용.