上海医学
上海醫學
상해의학
SHANGHAI MEDICAL JOURNAL
2012年
8期
678-682,封二
,共6页
贾丽洁%陆菡%张富军%薛庆生%罗艳%于布为
賈麗潔%陸菡%張富軍%薛慶生%囉豔%于佈為
가려길%륙함%장부군%설경생%라염%우포위
细胞凋亡%天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3%凋亡诱导因子%脂多糖%急性肺损伤
細胞凋亡%天鼕氨痠半胱氨痠蛋白酶-3%凋亡誘導因子%脂多糖%急性肺損傷
세포조망%천동안산반광안산단백매-3%조망유도인자%지다당%급성폐손상
目的 研究不同剂量脂多糖(LPS)诱导的不同程度急性肺损伤(ALI)的细胞凋亡机制.方法 雄性Sprague Dawley大鼠20只,随机分为4组,每组5只,分别在七氟烷麻醉下经尾静脉注射1 mL 0.9％氯化钠溶液(对照组)或LPS 5、10、20 mg/kg(分别为LPS5组、LPS10组和LPS20组).6h后处死大鼠,通过苏木精-伊红染色观察大鼠肺组织形态学改变,肺组织湿/干比值(W/D值)评估肺组织水肿,脱氧核苷酸末端转移酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)染色法检测肺组织细胞凋亡,Western印迹法检测肺组织中天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)和凋亡诱导因子(AIF)的表达水平.结果 光学显微镜下可见对照组大鼠肺组织无明显损伤,LPS5组大鼠肺组织结构轻微破坏,LPS10组和LPS20组大鼠肺组织损伤严重.LPS5组、LPS10组、LPS20组的W/D值均显著高于对照组(P值均＜0.05),且随着LPS剂量的增加,LPS5组、LPS10组、LPS20组的W/D值依次增大,两两比较的差异均有统计学意义(P值均＜0.05).对照组大鼠肺组织基本未见到凋亡细胞,LPS5组、LPS10组、LPS20组大鼠肺组织的细胞凋亡率均显著高于对照组(P值均＜0.05),凋亡细胞以肺泡上皮细胞为主.LPS5组大鼠肺组织中活化Caspase-3的相对表达量显著高于对照组(P＜0.05),而LPS10组和LPS20组与对照组间的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).LPS5组大鼠肺组织中活化AIF的相对表达量较对照组有增加的趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05),但LPS10组和LPS20组活化AIF的相对表达量均显著高于对照组(P值均＜0.05).结论 不同剂量LPS诱导的ALI中,5 mg/kgLPS诱导的较轻的ALI主要激活了Caspase-3凋亡途径,而10和20 mg/kg LPS诱导的较严重的ALI则主要活化AIF凋亡信号,这为ALI的抗凋亡治疗提供了潜在的靶点.
目的 研究不同劑量脂多糖(LPS)誘導的不同程度急性肺損傷(ALI)的細胞凋亡機製.方法 雄性Sprague Dawley大鼠20隻,隨機分為4組,每組5隻,分彆在七氟烷痳醉下經尾靜脈註射1 mL 0.9％氯化鈉溶液(對照組)或LPS 5、10、20 mg/kg(分彆為LPS5組、LPS10組和LPS20組).6h後處死大鼠,通過囌木精-伊紅染色觀察大鼠肺組織形態學改變,肺組織濕/榦比值(W/D值)評估肺組織水腫,脫氧覈苷痠末耑轉移酶介導的生物素化dUTP缺口末耑標記技術(TUNEL)染色法檢測肺組織細胞凋亡,Western印跡法檢測肺組織中天鼕氨痠半胱氨痠蛋白酶-3 (Caspase-3)和凋亡誘導因子(AIF)的錶達水平.結果 光學顯微鏡下可見對照組大鼠肺組織無明顯損傷,LPS5組大鼠肺組織結構輕微破壞,LPS10組和LPS20組大鼠肺組織損傷嚴重.LPS5組、LPS10組、LPS20組的W/D值均顯著高于對照組(P值均＜0.05),且隨著LPS劑量的增加,LPS5組、LPS10組、LPS20組的W/D值依次增大,兩兩比較的差異均有統計學意義(P值均＜0.05).對照組大鼠肺組織基本未見到凋亡細胞,LPS5組、LPS10組、LPS20組大鼠肺組織的細胞凋亡率均顯著高于對照組(P值均＜0.05),凋亡細胞以肺泡上皮細胞為主.LPS5組大鼠肺組織中活化Caspase-3的相對錶達量顯著高于對照組(P＜0.05),而LPS10組和LPS20組與對照組間的差異均無統計學意義(P值均＞0.05).LPS5組大鼠肺組織中活化AIF的相對錶達量較對照組有增加的趨勢,但差異無統計學意義(P＞0.05),但LPS10組和LPS20組活化AIF的相對錶達量均顯著高于對照組(P值均＜0.05).結論 不同劑量LPS誘導的ALI中,5 mg/kgLPS誘導的較輕的ALI主要激活瞭Caspase-3凋亡途徑,而10和20 mg/kg LPS誘導的較嚴重的ALI則主要活化AIF凋亡信號,這為ALI的抗凋亡治療提供瞭潛在的靶點.
목적 연구불동제량지다당(LPS)유도적불동정도급성폐손상(ALI)적세포조망궤제.방법 웅성Sprague Dawley대서20지,수궤분위4조,매조5지,분별재칠불완마취하경미정맥주사1 mL 0.9％록화납용액(대조조)혹LPS 5、10、20 mg/kg(분별위LPS5조、LPS10조화LPS20조).6h후처사대서,통과소목정-이홍염색관찰대서폐조직형태학개변,폐조직습/간비치(W/D치)평고폐조직수종,탈양핵감산말단전이매개도적생물소화dUTP결구말단표기기술(TUNEL)염색법검측폐조직세포조망,Western인적법검측폐조직중천동안산반광안산단백매-3 (Caspase-3)화조망유도인자(AIF)적표체수평.결과 광학현미경하가견대조조대서폐조직무명현손상,LPS5조대서폐조직결구경미파배,LPS10조화LPS20조대서폐조직손상엄중.LPS5조、LPS10조、LPS20조적W/D치균현저고우대조조(P치균＜0.05),차수착LPS제량적증가,LPS5조、LPS10조、LPS20조적W/D치의차증대,량량비교적차이균유통계학의의(P치균＜0.05).대조조대서폐조직기본미견도조망세포,LPS5조、LPS10조、LPS20조대서폐조직적세포조망솔균현저고우대조조(P치균＜0.05),조망세포이폐포상피세포위주.LPS5조대서폐조직중활화Caspase-3적상대표체량현저고우대조조(P＜0.05),이LPS10조화LPS20조여대조조간적차이균무통계학의의(P치균＞0.05).LPS5조대서폐조직중활화AIF적상대표체량교대조조유증가적추세,단차이무통계학의의(P＞0.05),단LPS10조화LPS20조활화AIF적상대표체량균현저고우대조조(P치균＜0.05).결론 불동제량LPS유도적ALI중,5 mg/kgLPS유도적교경적ALI주요격활료Caspase-3조망도경,이10화20 mg/kg LPS유도적교엄중적ALI칙주요활화AIF조망신호,저위ALI적항조망치료제공료잠재적파점.
