CAJ | 학술논문

目的探讨脱细胞胆管细胞外基质(ECM)的制备方法及其替代胆总管缺损的可行性.方法采用4因素3水平9次实验的正交设计[L9(34)],切取活体犬的肝外胆管39段,每段长1 cm,其中27段按正交设计随机分为9组行脱细胞处理,试验重复3次.采用苏木素-伊红(HE)染色及计算机图像分析对ECM进行残余细胞成分计数,进行极差分析及方差分析,获得制备ECM的最佳方案.另12段胆管按最佳方案制备成ECM并用于同种异体胆总管缺损修复实验.分别于术后2、4、12及24周取材观察缺损修复处组织再生情况.结果脱细胞后第7、9组未发现残余细胞,ECM富含胶原,第9组胶原呈立体交叉交联.移植术后2周,ECM内膜面见少量单层上皮细胞,有血管长入其中,ECM中有少量成纤维和平滑肌细胞,吻合口处有较多炎性细胞浸润;4周ECM管腔被上皮细胞覆盖,排列整齐,ECM中有较多成纤维和少量平滑肌细胞,吻合口有少量炎性细胞浸润;12周吻合痕迹消失,ECM中有较多成纤维、平滑肌细胞和少量纤维细胞;24周ECM中有以平滑肌细胞和纤维细胞为主,少量成纤维细胞,结构近似正常.结论制备ECM中3个关键条件的最佳水平为A3B3C3,即在胆管脱细胞处理过程中采用0.4%胰蛋白酶、1.0%叠氮二苯基磷(DPPA)、40 U/ml DNA酶.所得ECM应用于犬同种异体胆总管端端吻合修补,效果满意.
목적 탐토탈세포담관세포외기질(ECM)적제비방법급기체대담총관결손적가행성.방법 채용4인소3수평9차실험적정교설계[L9(34)],절취활체견적간외담관39단,매단장1 cm,기중27단안정교설계수궤분위9조행탈세포처리,시험중복3차.채용소목소-이홍(HE)염색급계산궤도상분석대ECM진행잔여세포성분계수,진행겁차분석급방차분석,획득제비ECM적최가방안.령12단담관안최가방안제비성ECM병용우동충이체담총관결손수복실험.분별우술후2、4、12급24주취재관찰결손수복처조직재생정황.결과 탈세포후제7、9조미발현잔여세포,ECM부함효원,제9조효원정입체교차교련.이식술후2주,ECM내막면견소량단층상피세포,유혈관장입기중,ECM중유소량성섬유화평활기세포,문합구처유교다염성세포침윤;4주ECM관강피상피세포복개,배렬정제,ECM중유교다성섬유화소량평활기세포,문합구유소량염성세포침윤;12주문합흔적소실,ECM중유교다성섬유、평활기세포화소량섬유세포;24주ECM중유이평활기세포화섬유세포위주,소량성섬유세포,결구근사정상.결론 제비ECM중3개관건조건적최가수평위A3B3C3,즉재담관탈세포처리과정중채용0.4%이단백매、1.0%첩담이분기린(DPPA)、40 U/ml DNA매.소득ECM응용우견동충이체담총관단단문합수보,효과만의.