中华医学遗传学杂志
中華醫學遺傳學雜誌
중화의학유전학잡지
CHINESE JOURNAL OF MEDICAL GENETICS
2006年
1期
32-36
,共5页
王朝夫%周晓燕%张太明%孙孟红%徐烨%施达仁
王朝伕%週曉燕%張太明%孫孟紅%徐燁%施達仁
왕조부%주효연%장태명%손맹홍%서엽%시체인
MLH1基因%MSH2基因%结直肠癌%遗传性非息肉性%逆转录%胚系突变
MLH1基因%MSH2基因%結直腸癌%遺傳性非息肉性%逆轉錄%胚繫突變
MLH1기인%MSH2기인%결직장암%유전성비식육성%역전록%배계돌변
目的检测胚系MLH1和MSH2基因mRNA突变,确立遗传性非息肉性结直肠癌(hereditary nonpolyposis colorectal cancer, HNPCC)家系.方法收集符合Amsterdam标准Ⅱ的12个家系14名家庭成员外周血,用特异引物和耐热性逆转录酶特异地逆转录MLH1和MSH2的RNA;利用长模板PCR扩增酶扩增逆转录产物(cDNA);测序分析扩增产物.提取外周血的DNA,设计与利用上述方法检测出突变对应外显子的特异性引物,利用Taq DNA聚合酶扩增测序,以检测上述方法的有效性.结果利用基于外周血mRNA的方法,在6个家系中检出6个胚系突变,4个MLH1突变和2个MSH2突变,MLH1突变分别位于第8、12、16和第19外显子;MSH2突变分别位于第1和第2外显子.利用基于外周血DNA的方法,上述突变均在MLH1和MSH2相应的外显子中得到验证.突变类型为4个错义突变、1个同义突变和1个非编码区突变;其中5个突变国际上尚未报道; 6个突变中有5个为病理性,分布于5个不同家系,该5个家系被确诊为HNPCC家系.结论基于外周血MLH1和MSH2 mRNA异常的检测能确诊HNPCC家系;该方法敏感、省时、节约成本.
目的檢測胚繫MLH1和MSH2基因mRNA突變,確立遺傳性非息肉性結直腸癌(hereditary nonpolyposis colorectal cancer, HNPCC)傢繫.方法收集符閤Amsterdam標準Ⅱ的12箇傢繫14名傢庭成員外週血,用特異引物和耐熱性逆轉錄酶特異地逆轉錄MLH1和MSH2的RNA;利用長模闆PCR擴增酶擴增逆轉錄產物(cDNA);測序分析擴增產物.提取外週血的DNA,設計與利用上述方法檢測齣突變對應外顯子的特異性引物,利用Taq DNA聚閤酶擴增測序,以檢測上述方法的有效性.結果利用基于外週血mRNA的方法,在6箇傢繫中檢齣6箇胚繫突變,4箇MLH1突變和2箇MSH2突變,MLH1突變分彆位于第8、12、16和第19外顯子;MSH2突變分彆位于第1和第2外顯子.利用基于外週血DNA的方法,上述突變均在MLH1和MSH2相應的外顯子中得到驗證.突變類型為4箇錯義突變、1箇同義突變和1箇非編碼區突變;其中5箇突變國際上尚未報道; 6箇突變中有5箇為病理性,分佈于5箇不同傢繫,該5箇傢繫被確診為HNPCC傢繫.結論基于外週血MLH1和MSH2 mRNA異常的檢測能確診HNPCC傢繫;該方法敏感、省時、節約成本.
목적검측배계MLH1화MSH2기인mRNA돌변,학립유전성비식육성결직장암(hereditary nonpolyposis colorectal cancer, HNPCC)가계.방법수집부합Amsterdam표준Ⅱ적12개가계14명가정성원외주혈,용특이인물화내열성역전록매특이지역전록MLH1화MSH2적RNA;이용장모판PCR확증매확증역전록산물(cDNA);측서분석확증산물.제취외주혈적DNA,설계여이용상술방법검측출돌변대응외현자적특이성인물,이용Taq DNA취합매확증측서,이검측상술방법적유효성.결과이용기우외주혈mRNA적방법,재6개가계중검출6개배계돌변,4개MLH1돌변화2개MSH2돌변,MLH1돌변분별위우제8、12、16화제19외현자;MSH2돌변분별위우제1화제2외현자.이용기우외주혈DNA적방법,상술돌변균재MLH1화MSH2상응적외현자중득도험증.돌변류형위4개착의돌변、1개동의돌변화1개비편마구돌변;기중5개돌변국제상상미보도; 6개돌변중유5개위병이성,분포우5개불동가계,해5개가계피학진위HNPCC가계.결론기우외주혈MLH1화MSH2 mRNA이상적검측능학진HNPCC가계;해방법민감、성시、절약성본.
