CAJ | 학술논문

目的检测细胞外钙离子(Ca2+)浓度对高剪切力诱导血小板聚集的影响,并测定高剪切力活化血小板时血小板内Ca2+浓度的变化,探讨Ca2+在剪切力活化血小板中的作用.方法用锥板黏度计施加高剪切力作用,以荧光抗体CD61 PerCP标记血小板,流式细胞术(FCM)测定血小板聚集率.以荧光染料Fluo-3 AM标记血小板,FCM测定高剪切力作用后血小板内Ca2+浓度;并测定二磷酸腺苷(ADP)对高剪切力作用下Ca2+反应的影响.结果洗涤全血标本或加入钙离子螯合剂乙二醇四乙酸(EGTA),造成细胞外低钙或无钙环境,高剪切力诱导的血小板聚集率由59.6%±5.1%下降到很低水平,而加入外源性Ca2+在一定程度上增强这种聚集.全血标本受到高剪切力作用,血小板内Ca2+浓度发生明显的升高;增加细胞外Ca2+浓度能增强这种反应,降低细胞外Ca2+浓度或阻断血小板膜糖蛋白GPⅠb/Ⅸ与血浆血管假性血友病因子(vWF)之间的相互作用,使血小板Ca2+反应消失,而阻断GPⅡb/Ⅲa与血浆vWF之间的相互作用则无明显影响.低浓度的ADP与高剪切力对血小板钙离子反应有协同作用.结论细胞外Ca2+是高剪切力诱导血小板聚集的必需条件,血小板内Ca2+反应可能是剪切力活化血小板时信息传递的重要物质基础.
목적검측세포외개리자(Ca2+)농도대고전절력유도혈소판취집적영향,병측정고전절력활화혈소판시혈소판내Ca2+농도적변화,탐토Ca2+재전절력활화혈소판중적작용.방법용추판점도계시가고전절력작용,이형광항체CD61 PerCP표기혈소판,류식세포술(FCM)측정혈소판취집솔.이형광염료Fluo-3 AM표기혈소판,FCM측정고전절력작용후혈소판내Ca2+농도;병측정이린산선감(ADP)대고전절력작용하Ca2+반응적영향.결과세조전혈표본혹가입개리자오합제을이순사을산(EGTA),조성세포외저개혹무개배경,고전절력유도적혈소판취집솔유59.6%±5.1%하강도흔저수평,이가입외원성Ca2+재일정정도상증강저충취집.전혈표본수도고전절력작용,혈소판내Ca2+농도발생명현적승고;증가세포외Ca2+농도능증강저충반응,강저세포외Ca2+농도혹조단혈소판막당단백GPⅠb/Ⅸ여혈장혈관가성혈우병인자(vWF)지간적상호작용,사혈소판Ca2+반응소실,이조단GPⅡb/Ⅲa여혈장vWF지간적상호작용칙무명현영향.저농도적ADP여고전절력대혈소판개리자반응유협동작용.결론세포외Ca2+시고전절력유도혈소판취집적필수조건,혈소판내Ca2+반응가능시전절력활화혈소판시신식전체적중요물질기출.