中华口腔医学杂志
中華口腔醫學雜誌
중화구강의학잡지
Chinese Journal of Stomatology
2006年
4期
216-219
,共4页
张玉峰%程祥荣%施斌%徐东选
張玉峰%程祥榮%施斌%徐東選
장옥봉%정상영%시빈%서동선
牙周韧带%干细胞%细胞分化
牙週韌帶%榦細胞%細胞分化
아주인대%간세포%세포분화
目的从成体人牙周组织中分离培养牙周韧带干细胞,研究其分化为软骨细胞的可行性.方法选取10～15岁的年轻患者因正畸拔除的健康牙齿,刮取根中1/3的牙周膜,采用组织块培养法得到牙周韧带细胞,待细胞达一定量后用有限元稀释法进行单细胞克隆,筛选牙周韧带干细胞(PDLSC),体外采用离心管聚集体诱导法进行软骨化诱导培养,光镜下观察诱导细胞形态学的改变,甲苯胺蓝染色、免疫组化、RT-PCR等方法检测胶原和糖蛋白的体外表达情况.结果体外离心管聚集体诱导培养3周后,实验组呈白色半透明状,甲苯胺蓝染色显示在外周区域有大量软骨基质成分沉积,组织学显示有较为明显的软骨陷窝.免疫组化及RT-PCR检测到Ⅱ型胶原表达,Ⅱ型胶原染色呈强阳性.对照组细胞团块逐渐收缩、崩解,组织学检测无软骨陷窝结构,Ⅱ型胶原免疫组化结果阴性.结论从成体人牙周组织中可分离培养出干细胞,在体外能有效增殖且保持低分化状态,具有作为软骨组织工程种子细胞来源的可能,也为牙周组织工程的应用奠定了实验基础.
目的從成體人牙週組織中分離培養牙週韌帶榦細胞,研究其分化為軟骨細胞的可行性.方法選取10～15歲的年輕患者因正畸拔除的健康牙齒,颳取根中1/3的牙週膜,採用組織塊培養法得到牙週韌帶細胞,待細胞達一定量後用有限元稀釋法進行單細胞剋隆,篩選牙週韌帶榦細胞(PDLSC),體外採用離心管聚集體誘導法進行軟骨化誘導培養,光鏡下觀察誘導細胞形態學的改變,甲苯胺藍染色、免疫組化、RT-PCR等方法檢測膠原和糖蛋白的體外錶達情況.結果體外離心管聚集體誘導培養3週後,實驗組呈白色半透明狀,甲苯胺藍染色顯示在外週區域有大量軟骨基質成分沉積,組織學顯示有較為明顯的軟骨陷窩.免疫組化及RT-PCR檢測到Ⅱ型膠原錶達,Ⅱ型膠原染色呈彊暘性.對照組細胞糰塊逐漸收縮、崩解,組織學檢測無軟骨陷窩結構,Ⅱ型膠原免疫組化結果陰性.結論從成體人牙週組織中可分離培養齣榦細胞,在體外能有效增殖且保持低分化狀態,具有作為軟骨組織工程種子細胞來源的可能,也為牙週組織工程的應用奠定瞭實驗基礎.
목적종성체인아주조직중분리배양아주인대간세포,연구기분화위연골세포적가행성.방법선취10～15세적년경환자인정기발제적건강아치,괄취근중1/3적아주막,채용조직괴배양법득도아주인대세포,대세포체일정량후용유한원희석법진행단세포극륭,사선아주인대간세포(PDLSC),체외채용리심관취집체유도법진행연골화유도배양,광경하관찰유도세포형태학적개변,갑분알람염색、면역조화、RT-PCR등방법검측효원화당단백적체외표체정황.결과체외리심관취집체유도배양3주후,실험조정백색반투명상,갑분알람염색현시재외주구역유대량연골기질성분침적,조직학현시유교위명현적연골함와.면역조화급RT-PCR검측도Ⅱ형효원표체,Ⅱ형효원염색정강양성.대조조세포단괴축점수축、붕해,조직학검측무연골함와결구,Ⅱ형효원면역조화결과음성.결론종성체인아주조직중가분리배양출간세포,재체외능유효증식차보지저분화상태,구유작위연골조직공정충자세포래원적가능,야위아주조직공정적응용전정료실험기출.
