白血病·淋巴瘤
白血病·淋巴瘤
백혈병·림파류
JOURNAL OF LEUKEMIA & LYMPHOMA
2005年
2期
72-75
,共4页
费新红%许小平%江千里%陈莉%吕书晴%高磊%楼敬伟
費新紅%許小平%江韆裏%陳莉%呂書晴%高磊%樓敬偉
비신홍%허소평%강천리%진리%려서청%고뢰%루경위
绿荧光蛋白%白血病%模型%基因转移%多药耐药
綠熒光蛋白%白血病%模型%基因轉移%多藥耐藥
록형광단백%백혈병%모형%기인전이%다약내약
目的建立增强型绿荧光蛋白(EGFP)基因标记的小鼠多药耐药白血病模型.方法以磷酸钙沉淀法将pLNG-EGFP质粒导入ФNX-E包装细胞,用脂质体转染的方法获得高滴度的EGFP病毒,并转导入小鼠多药耐药白血病细胞;采用悬浮细胞培养观察该细胞的生长规律;流式细胞术分析细胞周期分布;RT-PCR方法检测mdr1a基因表达;体内接种观察白血病发病情况并比较其耐药性的变化.结果将pLNG-EGFP质粒导入ФNX-E包装细胞后,收集细胞培养上清,病毒滴度为(4.5±3.4)×106CFU/mL.病毒转染后的小鼠多药耐药白血病细胞P388/VCR-G能稳定地表达绿色荧光.与P388/VCR细胞相比,P388/VCR-G细胞倍增时间、周期分析无明显差异;RT-PCR检测mdr1a基因的结果为:P388/S-G细胞阴性,P388/VCR-G细胞阳性.P388/VCR-G细胞在DBA小鼠体内也具有耐药性.所有接种P388/VCR-G细胞的DBA小鼠均死于腹水型白血病.结论建立了在体内稳定表达EGFP的小鼠多药耐药白血病模型,为研究多药耐药提供一种新的工具.
目的建立增彊型綠熒光蛋白(EGFP)基因標記的小鼠多藥耐藥白血病模型.方法以燐痠鈣沉澱法將pLNG-EGFP質粒導入ФNX-E包裝細胞,用脂質體轉染的方法穫得高滴度的EGFP病毒,併轉導入小鼠多藥耐藥白血病細胞;採用懸浮細胞培養觀察該細胞的生長規律;流式細胞術分析細胞週期分佈;RT-PCR方法檢測mdr1a基因錶達;體內接種觀察白血病髮病情況併比較其耐藥性的變化.結果將pLNG-EGFP質粒導入ФNX-E包裝細胞後,收集細胞培養上清,病毒滴度為(4.5±3.4)×106CFU/mL.病毒轉染後的小鼠多藥耐藥白血病細胞P388/VCR-G能穩定地錶達綠色熒光.與P388/VCR細胞相比,P388/VCR-G細胞倍增時間、週期分析無明顯差異;RT-PCR檢測mdr1a基因的結果為:P388/S-G細胞陰性,P388/VCR-G細胞暘性.P388/VCR-G細胞在DBA小鼠體內也具有耐藥性.所有接種P388/VCR-G細胞的DBA小鼠均死于腹水型白血病.結論建立瞭在體內穩定錶達EGFP的小鼠多藥耐藥白血病模型,為研究多藥耐藥提供一種新的工具.
목적건립증강형록형광단백(EGFP)기인표기적소서다약내약백혈병모형.방법이린산개침정법장pLNG-EGFP질립도입ФNX-E포장세포,용지질체전염적방법획득고적도적EGFP병독,병전도입소서다약내약백혈병세포;채용현부세포배양관찰해세포적생장규률;류식세포술분석세포주기분포;RT-PCR방법검측mdr1a기인표체;체내접충관찰백혈병발병정황병비교기내약성적변화.결과장pLNG-EGFP질립도입ФNX-E포장세포후,수집세포배양상청,병독적도위(4.5±3.4)×106CFU/mL.병독전염후적소서다약내약백혈병세포P388/VCR-G능은정지표체록색형광.여P388/VCR세포상비,P388/VCR-G세포배증시간、주기분석무명현차이;RT-PCR검측mdr1a기인적결과위:P388/S-G세포음성,P388/VCR-G세포양성.P388/VCR-G세포재DBA소서체내야구유내약성.소유접충P388/VCR-G세포적DBA소서균사우복수형백혈병.결론건립료재체내은정표체EGFP적소서다약내약백혈병모형,위연구다약내약제공일충신적공구.
