厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2011年
6期
1053-1058
,共6页
郑芳芳%阮路%刘艳%吴学记%赵玉芬
鄭芳芳%阮路%劉豔%吳學記%趙玉芬
정방방%원로%류염%오학기%조옥분
人类腺苷核糖基化因子%重组表达%荧光光谱
人類腺苷覈糖基化因子%重組錶達%熒光光譜
인류선감핵당기화인자%중조표체%형광광보
腺苷酸核糖基化因子1(ADP ribosylation factor 1,ARF1)是一种小G蛋白,负责调控细胞内的囊泡运输,从而影响细胞的生长发育.采用分子克隆的方法构建人类ARF1(hARF1)蛋白的重组质粒pET28 a-hARF1,并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21( DE3)中表达纯化,随后利用荧光光谱法和分子对接方法研究hARF1蛋白与嘌呤核苷酸( GDP/ADP)之间的弱相互作用.研究结果表明,重组表达的hARF1蛋白分子质量22 859.29 u,与理论值基本一致,其纯度大于95％,产率为5 mg/L左右；GDP/ADP与hARF1蛋白弱相互作用的结合常数分别为0.022 69和0.007 71(μmol/L)-1,说明hARF1蛋白选择性地结合GDP,这与细胞内hARF1蛋白只结合GDP的结论一致.
腺苷痠覈糖基化因子1(ADP ribosylation factor 1,ARF1)是一種小G蛋白,負責調控細胞內的囊泡運輸,從而影響細胞的生長髮育.採用分子剋隆的方法構建人類ARF1(hARF1)蛋白的重組質粒pET28 a-hARF1,併在大腸桿菌(Escherichia coli)BL21( DE3)中錶達純化,隨後利用熒光光譜法和分子對接方法研究hARF1蛋白與嘌呤覈苷痠( GDP/ADP)之間的弱相互作用.研究結果錶明,重組錶達的hARF1蛋白分子質量22 859.29 u,與理論值基本一緻,其純度大于95％,產率為5 mg/L左右；GDP/ADP與hARF1蛋白弱相互作用的結閤常數分彆為0.022 69和0.007 71(μmol/L)-1,說明hARF1蛋白選擇性地結閤GDP,這與細胞內hARF1蛋白隻結閤GDP的結論一緻.
선감산핵당기화인자1(ADP ribosylation factor 1,ARF1)시일충소G단백,부책조공세포내적낭포운수,종이영향세포적생장발육.채용분자극륭적방법구건인류ARF1(hARF1)단백적중조질립pET28 a-hARF1,병재대장간균(Escherichia coli)BL21( DE3)중표체순화,수후이용형광광보법화분자대접방법연구hARF1단백여표령핵감산( GDP/ADP)지간적약상호작용.연구결과표명,중조표체적hARF1단백분자질량22 859.29 u,여이론치기본일치,기순도대우95％,산솔위5 mg/L좌우；GDP/ADP여hARF1단백약상호작용적결합상수분별위0.022 69화0.007 71(μmol/L)-1,설명hARF1단백선택성지결합GDP,저여세포내hARF1단백지결합GDP적결론일치.
