中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志
中華骨質疏鬆和骨礦鹽疾病雜誌
중화골질소송화골광염질병잡지
CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS AND BONE MINERAL RESEARCH
2011年
2期
101-107
,共7页
Calpain%破骨细胞分化%RANKL%RAW264.7细胞%骨凹陷
Calpain%破骨細胞分化%RANKL%RAW264.7細胞%骨凹陷
Calpain%파골세포분화%RANKL%RAW264.7세포%골요함
目的 探讨Calpain及其抑制剂Calpastatin能否抑制核因子-κB活化受体配体(receptor activatorof NFκB ligand,RANKL)诱导的小鼠破骨细胞分化.方法 体外培养小鼠RAW264.7细胞,在诱导组分别加入不同浓度的RANKL(0、20、50、70、100ng/mL),并另设抑制剂组加入RANKL 50ng/mL和Calpastatin50 nmol/L,共同诱导分化6 d至破骨细胞分化成熟.第2天应用荧光定量分析试剂盒分析各组Calpain活性,并在第6天应用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色和骨凹陷分析方法(pitformation assay)比较各组破骨细胞分化程度的差异.结果 Calpain活性随RANKL剂量的增加而递增(P<0.05),其活性分别与TRAP阳性细胞数和骨凹陷面积呈正相关,相关性具有统计学意义(P<0.05).Calpastatin抑制剂组与单纯RANKL 50ng/mL诱导组相比,TRAP阳性细胞数和骨凹陷面积均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Calpain是小鼠RAW264.7细胞中RANK L诱导的破骨细胞分化过程中的关键因子,使用Calpastatin抑制Calpain活性可以有效抑制RANKL诱导的破骨细胞分化.Calpain可能成为抑制破骨细胞分化和骨质破坏的新型治疗靶点.
目的 探討Calpain及其抑製劑Calpastatin能否抑製覈因子-κB活化受體配體(receptor activatorof NFκB ligand,RANKL)誘導的小鼠破骨細胞分化.方法 體外培養小鼠RAW264.7細胞,在誘導組分彆加入不同濃度的RANKL(0、20、50、70、100ng/mL),併另設抑製劑組加入RANKL 50ng/mL和Calpastatin50 nmol/L,共同誘導分化6 d至破骨細胞分化成熟.第2天應用熒光定量分析試劑盒分析各組Calpain活性,併在第6天應用抗酒石痠痠性燐痠酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色和骨凹陷分析方法(pitformation assay)比較各組破骨細胞分化程度的差異.結果 Calpain活性隨RANKL劑量的增加而遞增(P<0.05),其活性分彆與TRAP暘性細胞數和骨凹陷麵積呈正相關,相關性具有統計學意義(P<0.05).Calpastatin抑製劑組與單純RANKL 50ng/mL誘導組相比,TRAP暘性細胞數和骨凹陷麵積均顯著降低,差異具有統計學意義(P<0.05).結論 Calpain是小鼠RAW264.7細胞中RANK L誘導的破骨細胞分化過程中的關鍵因子,使用Calpastatin抑製Calpain活性可以有效抑製RANKL誘導的破骨細胞分化.Calpain可能成為抑製破骨細胞分化和骨質破壞的新型治療靶點.
목적 탐토Calpain급기억제제Calpastatin능부억제핵인자-κB활화수체배체(receptor activatorof NFκB ligand,RANKL)유도적소서파골세포분화.방법 체외배양소서RAW264.7세포,재유도조분별가입불동농도적RANKL(0、20、50、70、100ng/mL),병령설억제제조가입RANKL 50ng/mL화Calpastatin50 nmol/L,공동유도분화6 d지파골세포분화성숙.제2천응용형광정량분석시제합분석각조Calpain활성,병재제6천응용항주석산산성린산매(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)염색화골요함분석방법(pitformation assay)비교각조파골세포분화정도적차이.결과 Calpain활성수RANKL제량적증가이체증(P<0.05),기활성분별여TRAP양성세포수화골요함면적정정상관,상관성구유통계학의의(P<0.05).Calpastatin억제제조여단순RANKL 50ng/mL유도조상비,TRAP양성세포수화골요함면적균현저강저,차이구유통계학의의(P<0.05).결론 Calpain시소서RAW264.7세포중RANK L유도적파골세포분화과정중적관건인자,사용Calpastatin억제Calpain활성가이유효억제RANKL유도적파골세포분화.Calpain가능성위억제파골세포분화화골질파배적신형치료파점.
