中国食品学报
中國食品學報
중국식품학보
JOURNAL OF CHINESE INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2011年
2期
8-16
,共9页
郭红敏%谷新晰%张玉兰%田洪涛%郭兴华%罗云波
郭紅敏%穀新晰%張玉蘭%田洪濤%郭興華%囉雲波
곽홍민%곡신석%장옥란%전홍도%곽흥화%라운파
德式乳杆菌保加利亚亚种%组成型表达载体%质粒pMG36e%电转化%电转化效率
德式乳桿菌保加利亞亞種%組成型錶達載體%質粒pMG36e%電轉化%電轉化效率
덕식유간균보가리아아충%조성형표체재체%질립pMG36e%전전화%전전화효솔
以典型的乳酸菌组成型表达质粒pMG36e为载体,德式乳杆菌保加利亚亚种为受体.采用电转化方法研究受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电转化参数、复苏培养基组成与复苏培养时间、受体菌株的限制修饰作用对电转化效率的影响,探讨电转化的最适条件,以提高电转化效率.结果表明:选择含2.5%甘氨酸的SMRS培养基培养受体细胞至对数中期,收获制成感受态细胞,在电场强度12 kV/cm、电阻200Ω、电容25μF条件下电击转化,以含20 mmol/L MgCl2、CaCl2的SMRS培养基复苏培养2 h,涂板筛选得到较高的电转化效率.特别是采用受体菌株修饰的质粒进行电转化,转化效率提高30倍以上,达到6.3×104cfu/μg DNA.本研究结果为进一步构建乳酸菌组成型高效表达系统和食品级基因工程乳酸菌株提供试验依据.
以典型的乳痠菌組成型錶達質粒pMG36e為載體,德式乳桿菌保加利亞亞種為受體.採用電轉化方法研究受體菌株的生長狀態與細胞壁處理方式、質粒濃度、電轉化參數、複囌培養基組成與複囌培養時間、受體菌株的限製脩飾作用對電轉化效率的影響,探討電轉化的最適條件,以提高電轉化效率.結果錶明:選擇含2.5%甘氨痠的SMRS培養基培養受體細胞至對數中期,收穫製成感受態細胞,在電場彊度12 kV/cm、電阻200Ω、電容25μF條件下電擊轉化,以含20 mmol/L MgCl2、CaCl2的SMRS培養基複囌培養2 h,塗闆篩選得到較高的電轉化效率.特彆是採用受體菌株脩飾的質粒進行電轉化,轉化效率提高30倍以上,達到6.3×104cfu/μg DNA.本研究結果為進一步構建乳痠菌組成型高效錶達繫統和食品級基因工程乳痠菌株提供試驗依據.
이전형적유산균조성형표체질립pMG36e위재체,덕식유간균보가리아아충위수체.채용전전화방법연구수체균주적생장상태여세포벽처리방식、질립농도、전전화삼수、복소배양기조성여복소배양시간、수체균주적한제수식작용대전전화효솔적영향,탐토전전화적최괄조건,이제고전전화효솔.결과표명:선택함2.5%감안산적SMRS배양기배양수체세포지대수중기,수획제성감수태세포,재전장강도12 kV/cm、전조200Ω、전용25μF조건하전격전화,이함20 mmol/L MgCl2、CaCl2적SMRS배양기복소배양2 h,도판사선득도교고적전전화효솔.특별시채용수체균주수식적질립진행전전화,전화효솔제고30배이상,체도6.3×104cfu/μg DNA.본연구결과위진일보구건유산균조성형고효표체계통화식품급기인공정유산균주제공시험의거.
