重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2010年
11期
1687-1689
,共3页
王景涛%季平%邓诚%伍明毅%刘凯%孙守娟%邹波
王景濤%季平%鄧誠%伍明毅%劉凱%孫守娟%鄒波
왕경도%계평%산성%오명의%류개%손수연%추파
噬菌体展示%多肽库%人舌鳞癌%Tca8113
噬菌體展示%多肽庫%人舌鱗癌%Tca8113
서균체전시%다태고%인설린암%Tca8113
目的:本研究拟构建人舌鳞癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为进一步筛选和鉴定与舌鳞癌相关的蛋白或多肽打下基础.方法:人舌癌细胞株Tca8113,QiaGen法提取细胞mRNA,逆转录合成双链cDNA后与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到1-7噬菌体展示多肽文库.结果:构建了人舌鳞癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,原始文库重组滴度为鳞癌1.7×106 pfu,扩增后滴度为3×1010 pfu/mL.随机从文库中抽取10个克隆PCR扩增插入片断,电泳结果显示构建的文库中均有插入片段,文库插入率高达100%.所构建的文库插入片断大小在(0.4～1.0)kbp之间.结论:成功构建了人舌癌细胞株Tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为下一步筛选和鉴定与舌癌相关的蛋白或多肽奠定了基础.
目的:本研究擬構建人舌鱗癌細胞株Tca8113的T7噬菌體展示多肽文庫,為進一步篩選和鑒定與舌鱗癌相關的蛋白或多肽打下基礎.方法:人舌癌細胞株Tca8113,QiaGen法提取細胞mRNA,逆轉錄閤成雙鏈cDNA後與T7Select 10-3載體連接,體外包裝併擴增得到1-7噬菌體展示多肽文庫.結果:構建瞭人舌鱗癌細胞株Tca8113的T7噬菌體展示多肽文庫,原始文庫重組滴度為鱗癌1.7×106 pfu,擴增後滴度為3×1010 pfu/mL.隨機從文庫中抽取10箇剋隆PCR擴增插入片斷,電泳結果顯示構建的文庫中均有插入片段,文庫插入率高達100%.所構建的文庫插入片斷大小在(0.4～1.0)kbp之間.結論:成功構建瞭人舌癌細胞株Tca8113的T7噬菌體展示多肽文庫,為下一步篩選和鑒定與舌癌相關的蛋白或多肽奠定瞭基礎.
목적:본연구의구건인설린암세포주Tca8113적T7서균체전시다태문고,위진일보사선화감정여설린암상관적단백혹다태타하기출.방법:인설암세포주Tca8113,QiaGen법제취세포mRNA,역전록합성쌍련cDNA후여T7Select 10-3재체련접,체외포장병확증득도1-7서균체전시다태문고.결과:구건료인설린암세포주Tca8113적T7서균체전시다태문고,원시문고중조적도위린암1.7×106 pfu,확증후적도위3×1010 pfu/mL.수궤종문고중추취10개극륭PCR확증삽입편단,전영결과현시구건적문고중균유삽입편단,문고삽입솔고체100%.소구건적문고삽입편단대소재(0.4～1.0)kbp지간.결론:성공구건료인설암세포주Tca8113적T7서균체전시다태문고,위하일보사선화감정여설암상관적단백혹다태전정료기출.
