茶叶科学
茶葉科學
다협과학
2010年
3期
203-207
,共5页
杜军利%张传溪%肖强%付建玉%殷坤山
杜軍利%張傳溪%肖彊%付建玉%慇坤山
두군리%장전계%초강%부건옥%은곤산
茶尺蠖%核型多角体病毒%荧光定量PCR%检测
茶呎蠖%覈型多角體病毒%熒光定量PCR%檢測
다척확%핵형다각체병독%형광정량PCR%검측
根据茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis oblique nucleopolyhedrovirus,EoNPV)基因序列设计一对引物,并从感染该病毒的虫体中提取EoNPV基因组DNA,进行PCR扩增,将该基因片段与载体pMD18-T连接,转化入大肠杆菌TG1中,经单克隆菌落筛选及测序鉴定后得到重组质粒,以该质粒为荧光定量PCR标准品模板稀释后建立标准曲线.构建的标准曲线线性关系良好,相关系数为0.989,检测范围为103～108拷贝/μL,特异性和重复性较好.该方法可以准确地判断出病毒拷贝数,为茶尺蠖核型多角体病毒在虫体内增殖动态的研究和病毒制剂的质量检测提供了方法依据.
根據茶呎蠖覈型多角體病毒(Ectropis oblique nucleopolyhedrovirus,EoNPV)基因序列設計一對引物,併從感染該病毒的蟲體中提取EoNPV基因組DNA,進行PCR擴增,將該基因片段與載體pMD18-T連接,轉化入大腸桿菌TG1中,經單剋隆菌落篩選及測序鑒定後得到重組質粒,以該質粒為熒光定量PCR標準品模闆稀釋後建立標準麯線.構建的標準麯線線性關繫良好,相關繫數為0.989,檢測範圍為103～108拷貝/μL,特異性和重複性較好.該方法可以準確地判斷齣病毒拷貝數,為茶呎蠖覈型多角體病毒在蟲體內增殖動態的研究和病毒製劑的質量檢測提供瞭方法依據.
근거다척확핵형다각체병독(Ectropis oblique nucleopolyhedrovirus,EoNPV)기인서렬설계일대인물,병종감염해병독적충체중제취EoNPV기인조DNA,진행PCR확증,장해기인편단여재체pMD18-T련접,전화입대장간균TG1중,경단극륭균락사선급측서감정후득도중조질립,이해질립위형광정량PCR표준품모판희석후건립표준곡선.구건적표준곡선선성관계량호,상관계수위0.989,검측범위위103～108고패/μL,특이성화중복성교호.해방법가이준학지판단출병독고패수,위다척확핵형다각체병독재충체내증식동태적연구화병독제제적질량검측제공료방법의거.
