CAJ | 학술논문

目的探讨核转录因子(NF-κB)在诱导川崎病炎性细胞因子及血管内皮细胞损伤中的作用及机理. 方法建立人脐静脉内皮细胞培养模型,酶联免疫吸附实验(ELISA)双抗体夹心法检测川崎病患儿外周血单个核细胞(PBMC)活化后培养上清液白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌量;采用AnnexinⅤ/PI双染色法,流式细胞仪检测川崎病患儿PBMC培养上清液所诱导的内皮细胞凋亡率;凝胶电泳迁移率转换实验(EMSA)检测所活化PBMC核因子NF-κB的活性. 结果川崎病组患儿PBMC体外经刺激后IL-6、IL-1β、TNF-α等炎性细胞因子的分泌均明显高于正常对照组(P＜0.01),其培养上清液所诱导的内皮细胞凋亡率[(38.4 ±7.8)%]则较正常对照组[(2.8± 0.8)%]明显升高.分别加入足量白细胞介素6单克隆抗体(IL-6McAb)、肿瘤坏死因子α单克隆抗体(TNF-αMcAb)、白细胞介素1β受体a(IL-1ra)或联合加入上述阻断剂于川崎病患儿PBMC培养上清液中,可不同程度地逆转川崎病患儿PBMC培养上清液所诱导内皮细胞的凋亡.川崎病患儿PBMC刺激活化后NF-κB活性显著增高.NF-κB抑制剂SN50明显抑制川崎病患儿PBMC上述细胞因子的分泌,与此同时基本阻断川崎病患儿PBMC培养上清液所诱导内皮细胞的凋亡. 结论 NF-κB作为诱导多种炎性细胞因子如IL-6、IL-1β、TNF-α产生的上游环节,在介导川崎病患儿血管内皮细胞损伤中起关键作用.
목적탐토핵전록인자(NF-κB)재유도천기병염성세포인자급혈관내피세포손상중적작용급궤리. 방법건립인제정맥내피세포배양모형,매련면역흡부실험(ELISA)쌍항체협심법검측천기병환인외주혈단개핵세포(PBMC)활화후배양상청액백세포개소6(IL-6)、백세포개소1β(IL-1β)、종류배사인자α(TNF-α)적분비량;채용AnnexinⅤ/PI쌍염색법,류식세포의검측천기병환인PBMC배양상청액소유도적내피세포조망솔;응효전영천이솔전환실험(EMSA)검측소활화PBMC핵인자NF-κB적활성. 결과천기병조환인PBMC체외경자격후IL-6、IL-1β、TNF-α등염성세포인자적분비균명현고우정상대조조(P＜0.01),기배양상청액소유도적내피세포조망솔[(38.4 ±7.8)%]칙교정상대조조[(2.8± 0.8)%]명현승고.분별가입족량백세포개소6단극륭항체(IL-6McAb)、종류배사인자α단극륭항체(TNF-αMcAb)、백세포개소1β수체a(IL-1ra)혹연합가입상술조단제우천기병환인PBMC배양상청액중,가불동정도지역전천기병환인PBMC배양상청액소유도내피세포적조망.천기병환인PBMC자격활화후NF-κB활성현저증고.NF-κB억제제SN50명현억제천기병환인PBMC상술세포인자적분비,여차동시기본조단천기병환인PBMC배양상청액소유도내피세포적조망. 결론 NF-κB작위유도다충염성세포인자여IL-6、IL-1β、TNF-α산생적상유배절,재개도천기병환인혈관내피세포손상중기관건작용.