中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2009年
4期
299-302
,共4页
夏仁品%卢实春%武聚山%李宁%郑静
夏仁品%盧實春%武聚山%李寧%鄭靜
하인품%로실춘%무취산%리저%정정
OX40%基因沉默%小干扰RNA
OX40%基因沉默%小榦擾RNA
OX40%기인침묵%소간우RNA
目的:研究靶向大鼠OX40基因的二聚体小干扰RNA(siRNA-OX40) 对靶基因表达的沉默作用.方法:建立并筛选稳定表达OX40基因的293T转染细胞株,用脂质体转染法将体外合成的siRNA-OX40转染上述细胞株,采用实时荧光定量PCR检测靶基因OX40 mRNA表达情况.结果:用不同浓度的siRNA-OX40转染细胞48小时,10 nmol/L浓度对293T细胞靶基因表达的抑制作用最强 [抑制率(68.3±8.7)%],1 nmol/L浓度仍有一定的抑制作用[(37.2±4.8)%];25、10 nmol/L siRNA转染293T细胞后,均在24小时内起效[(21.4±3.2)%,(26.8±3.8)%],抑制作用至少能维持72小时[(61.7±8.4)%,(39.6±5.6)%].结论:siRNA-OX40对293T细胞外源性靶基因表达有较强的特异性沉默作用,siRNA在24小时内起效,48～72小时达高峰,抑制作用至少能维持72小时.本研究结果为下一步在动物或临床进行siRNA干扰试验提供了实验依据.
目的:研究靶嚮大鼠OX40基因的二聚體小榦擾RNA(siRNA-OX40) 對靶基因錶達的沉默作用.方法:建立併篩選穩定錶達OX40基因的293T轉染細胞株,用脂質體轉染法將體外閤成的siRNA-OX40轉染上述細胞株,採用實時熒光定量PCR檢測靶基因OX40 mRNA錶達情況.結果:用不同濃度的siRNA-OX40轉染細胞48小時,10 nmol/L濃度對293T細胞靶基因錶達的抑製作用最彊 [抑製率(68.3±8.7)%],1 nmol/L濃度仍有一定的抑製作用[(37.2±4.8)%];25、10 nmol/L siRNA轉染293T細胞後,均在24小時內起效[(21.4±3.2)%,(26.8±3.8)%],抑製作用至少能維持72小時[(61.7±8.4)%,(39.6±5.6)%].結論:siRNA-OX40對293T細胞外源性靶基因錶達有較彊的特異性沉默作用,siRNA在24小時內起效,48～72小時達高峰,抑製作用至少能維持72小時.本研究結果為下一步在動物或臨床進行siRNA榦擾試驗提供瞭實驗依據.
목적:연구파향대서OX40기인적이취체소간우RNA(siRNA-OX40) 대파기인표체적침묵작용.방법:건립병사선은정표체OX40기인적293T전염세포주,용지질체전염법장체외합성적siRNA-OX40전염상술세포주,채용실시형광정량PCR검측파기인OX40 mRNA표체정황.결과:용불동농도적siRNA-OX40전염세포48소시,10 nmol/L농도대293T세포파기인표체적억제작용최강 [억제솔(68.3±8.7)%],1 nmol/L농도잉유일정적억제작용[(37.2±4.8)%];25、10 nmol/L siRNA전염293T세포후,균재24소시내기효[(21.4±3.2)%,(26.8±3.8)%],억제작용지소능유지72소시[(61.7±8.4)%,(39.6±5.6)%].결론:siRNA-OX40대293T세포외원성파기인표체유교강적특이성침묵작용,siRNA재24소시내기효,48～72소시체고봉,억제작용지소능유지72소시.본연구결과위하일보재동물혹림상진행siRNA간우시험제공료실험의거.
