癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2008年
6期
432-436
,共5页
李德玲%李恩民%谢剑君%吴炳礼%张丕显%许丽艳
李德玲%李恩民%謝劍君%吳炳禮%張丕顯%許麗豔
리덕령%리은민%사검군%오병례%장비현%허려염
fascin蛋白%毕赤酵母%分泌表达%pPIC9载体
fascin蛋白%畢赤酵母%分泌錶達%pPIC9載體
fascin단백%필적효모%분비표체%pPIC9재체
背景与目的:应用酵母表达系统表达人的重要肿瘤分子标志物fascin蛋白.材料与方法:利用分子克隆技术将fascin基因完整编码区克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPIC9中,获得重组质粒pPICg-fascin;以限制性内切酶Mss I进行线性化并转化毕赤酵母GS115菌株,用PCR方法筛选出阳性整合克隆;对阳性克隆进行0.5%甲醇诱导表达重组蛋白,银染及Western blot检测培养上清中fascin重组蛋白的表达情况.结果:毕赤酵母能够分泌表达约69 kD的fascin重组蛋白,表达量为40 μg/L.结论:毕赤酵母可以分泌表达fascin蛋白,但由于分泌表达量较低,尚达不到工程化要求.
揹景與目的:應用酵母錶達繫統錶達人的重要腫瘤分子標誌物fascin蛋白.材料與方法:利用分子剋隆技術將fascin基因完整編碼區剋隆至畢赤酵母(Pichia pastoris)分泌錶達載體pPIC9中,穫得重組質粒pPICg-fascin;以限製性內切酶Mss I進行線性化併轉化畢赤酵母GS115菌株,用PCR方法篩選齣暘性整閤剋隆;對暘性剋隆進行0.5%甲醇誘導錶達重組蛋白,銀染及Western blot檢測培養上清中fascin重組蛋白的錶達情況.結果:畢赤酵母能夠分泌錶達約69 kD的fascin重組蛋白,錶達量為40 μg/L.結論:畢赤酵母可以分泌錶達fascin蛋白,但由于分泌錶達量較低,尚達不到工程化要求.
배경여목적:응용효모표체계통표체인적중요종류분자표지물fascin단백.재료여방법:이용분자극륭기술장fascin기인완정편마구극륭지필적효모(Pichia pastoris)분비표체재체pPIC9중,획득중조질립pPICg-fascin;이한제성내절매Mss I진행선성화병전화필적효모GS115균주,용PCR방법사선출양성정합극륭;대양성극륭진행0.5%갑순유도표체중조단백,은염급Western blot검측배양상청중fascin중조단백적표체정황.결과:필적효모능구분비표체약69 kD적fascin중조단백,표체량위40 μg/L.결론:필적효모가이분비표체fascin단백,단유우분비표체량교저,상체불도공정화요구.
